MAMDC2蛋白抗体分子标记技术

MAMDC2蛋白抗体分子标记技术：

（一）原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为残基,残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

（二）准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；

（三）操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；

2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；

6.碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

Southern Marker DL2000（DIG）（见关联产品）
Southern Marker DL2000（生物素）（见关联产品）
Southern Marker Oligo（DIG）（见关联产品）
Southern Marker Oligo（生物素）（见关联产品）
Southern专用DNA Marker（DIG）
Southern专用DNA Marker（生物素）
超螺旋DNA分子量标准（DNA marker）
大片段DNA分子量标准（DNA marker）
脉冲电泳Marker(低范围PFG)（见关联产品）（停产）
脉冲电泳Marker（Lambda LadderPFG）（见关联产品）
脉冲电泳Marker（酵母染色体PFG）（见关联产品）（停产）
核酸沉淀剂及助沉剂
Acryl DNA助沉剂（1 mL)
彩色Acryl DNA助沉剂（1 g)（停产）
超快非醇核酸沉淀剂（100次）
超快非醇核酸沉淀剂（30次）
分子生物学级糖原干粉（1g）
分子生物学级糖原溶液（1mL）
天净沙核酸浓缩剂
微量DNA助沉剂
微量RNA助沉剂
微量核酸沉淀剂
核酸纯化
96孔板PCR片段纯化回收试剂盒（离心法）（1次）
96孔板PCR片段纯化回收试剂盒（离心法）（5次）
96孔板PCR片段纯化回收试剂盒（真空法）（见关联产品）
低载量PCR片段纯化试剂盒（100次）