CHO 残留 DNA 检测试剂盒(PCR-荧光探针法)试剂盒简介：

CHO 残留DNA 检测试剂盒是用于定量检测各种生物制品及药品的中间品、半成品和成 品中残留的 CHO  宿主细胞 DNA。
本试剂盒利用 Taqman 探针法， 定量检测样本中 CHO  残留 DNA。该方法具有速度快、 特异性高、  性能可靠且 检测限可达到 fg 级别。
试剂盒组份：

表 1：试剂盒组份

试剂 装量 贮存条件
CHO control DNA 40ul×1 管 -20oC
DNA dilution buffer 6ml ×1 瓶 -20oC
2×Taqman master mix (+UNG/ROX) 0.75ml ×2 管 -20oC
10×CHO qPCR mix 0.3ml ×1 管 -20oC
RNase-Free H2O 1.5ml×1 管 -20oC
规格 ：100  反应
适用机型：
PRISM 7500 Real-Time PCR System (ABI)
StepOne Plus Real-Time PCR System (ABI)
LightCycler 480 (Roche)
AriaMX (Agilent Technologies)
CFX (BIO-RAD)

实验所需但试剂盒未包含材料：

? 1.5ml 无菌低吸附离心管
? 96 孔 qPCR  板
? 一次性手套
? 1000ul 、100ul 、10ul 无菌低吸附带滤芯移液枪头

相关设备：
?  离心机
? 涡旋振荡器
? 荧光定量 PCR 仪

? 1000ul 、100ul 、10ul 移液器

qPCR 程序参数设置(以 ABI 7500 为例)：

1.创建空白新程序，选择 定量检测模块。
2.创建新检测探针，命名为 CHO-DNA，选择报告荧光基团为 FAM，淬灭基团为 none,检测 参比荧光为 ROX。
3.设置两步法反应程序： 50oC 2min, 95oC 预变性 10min；95oC 10 sec，60oC 1min，40 个循环； 反应体积为 30ul。
qPCR 结果分析(以 ABI 7500 为例)
1.在 Results 的 Amplification  plot 面板中， 将 Threshold 设置为 0.05 ，点击 Analyze，此时可 初步查看扩增曲线的形态是否正常。
2.在 Results  的 Plate 面板中，将标准曲线孔的 Task 一栏设置为 Standard，并且在 Quantity 一栏分别赋值为 3000 、300 、30 、3 、0.3 、0.03  (含义为每孔的 DNA 量， 单位为 pg)， 并且
在相应的 Sample Name 一栏命名为 SD1 、SD2 、SD3 、SD4 、SD5 、SD6。
3.在 Results 的 Plate 面板中，将无模板对照 NTC 孔的 Task 一栏设置为 NTC，将阴性质控 NEG 孔、待测样本孔、样本 ERC 孔的 Task 一栏设置为