抗体的制备过程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，联祖通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫动物：常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采血，家兔、山羊、绵羊可采用采血。

4. 免疫血清的纯化与鉴定：得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。

5. 免疫血清的保存：抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。

别 名 Keyhole limpet hemocyanin (KLH)

纯化方法 affinity purified by Protein A

储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

产品应用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 

产品名称	血蓝蛋白抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg
英文名称	Anti-KLH
货号	LZK65074

英文名称 Anti-KLH

中文名称 血蓝蛋白抗体

浓 度 1mg/1ml

规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗体来源 Rabbit

克隆类型 polyclonal

交叉反应 Keyhole limpet hemocyanin (KLH)

产品类型 一抗

研究领域 免疫学

蛋白分子量 predicted molecular weight: 800-900kDa

性 状 Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH protein

亚 型 IgG

免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

 

抗体分子标记技术：

（一）原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

（二）准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；

2.仪器

凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。

（三）操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；

2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

保泰松标准品纯度：>95%p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810  5mgRho鸟苷交换子2抗原

甲妥拉明标准品纯度：>95%PARP(poly ADP-ribose polymerase  25mg  

盐妥拉明标准品纯度：>95%PARP(poly ADP-ribose polymerase  10mg多腺苷二多聚酶抗原

盐芬特明标准品纯度：>95%Parvalbumin  微白蛋白/细小清蛋白抗原 5mgParvalbumin  微白蛋白/细小清蛋白抗原

琥标准品纯度：>95%PAX8(Paired box gene 8  10mg配对盒基8抗原

盐苄明标准品纯度：>95%PAX9(Paired box gene 9  250mg配对盒基9抗原

吩噻嗪标准品纯度：>95%PBEF (CT  10g内脂素/B细胞克隆增强子

酞标准品纯度：>95%P-cadherin(placental  5gP-钙粘附分子抗原

酞标准品纯度：>95%p-Caldesmon(phosphor-Ser789  1g钙介质素抗原

标准品纯度：>95%PCNA(phosphos Dyr211  250mg peptide  增殖细胞核多肽抗原

标准品纯度：>95%PCX/PODXL(Podocalyxin  50mg足细胞特异蛋白抗原

马来拉敏标准品纯度：>95%PDCD4(programmed cell death 4  1g凋亡相关蛋白4抗原

茚二标准品纯度：>95%PDGF-A  血小板源性生长子-1（抗原  5g

降糖灵标准品纯度：>95%PDGF-B  血小板源性生长子-B（抗原  1g

酒石甲曲秦标准品纯度：>95%PDGF-BB peptide  血小板源性生长子-BB抗原 5gPDGF-BB peptide  血小板源性生长子-BB抗原
瘦素受体(Leptin receptor)抗体  英文名称：Leptin receptor ELISA Kit，Leptin receptor，

半乳凝素3(GAL-3)抗体  英文名称：GAL-3 ELISA Kit，GAL-3，

骨退特异标志物(CTX-2)抗体  英文名称：CTX-2 ELISA Kit，CTX-2，

甘露糖凝集素受体(MBLR)抗体  英文名称：MBLR ELISA Kit，MBLR，

高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)抗体  英文名称：HMGB-1 ELISA Kit，HMGB-1，

分泌粒蛋白1(嗜铬粒蛋白B)(CHGB/SCG1)抗体  英文名称：CHGB/SCG1 ELISA Kit，CHGB/SCG1，

儿茶(CA)抗体  英文名称：CA ELISA Kit，CA，

电子转移黄素蛋白β肽(ETFB)抗体  英文名称：ETFB ELISA Kit，ETFB，

蛋白二物异构酶前体(PDI)抗体  英文名称：PDI ELISA Kit，PDI，

催乳素抑制激素(PIH)抗体  英文名称：PIH ELISA Kit，PIH，

成纤维细胞生长子6(FGF6)抗体  英文名称：FGF6 ELISA Kit，FGF6，

补体蛋白9(C9)抗体  英文名称：C9 ELISA Kit，C9，

(PYD)抗体  英文名称：PYD ELISA Kit，PYD，

血蓝蛋白抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg免疫球蛋白M(IgM)抗体  英文名称：IgM ELISA Kit，IgM，

淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)抗体  英文名称：LFA-2/CD2 ELISA Kit，LFA-2/CD2，

类肝素(HS/HPS)抗体  英文名称：HS/HPS ELISA Kit，HS/HPS，

空泡毒素相关蛋白A(VacA)抗体  英文名称：VacA ELISA Kit，VacA，