上海联祖生物科技有限公司
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MDHm线粒体苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LZ-01582S
  • 发布日期: 2021-02-24
  • 更新日期: 2024-11-14
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01582S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 50管/48样
纯度 %
CAS编号
别名 线粒体苹果酸脱氢酶(MDHm)测试盒
分子式
是否进口



血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

MDHm线粒体苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法

50管/48样

紫外分光光度法

LZ-01582S

商品介绍:

测定意义
乙酰辅酶A广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化,经过这条通路氧化生成二氧化碳和水,释放能量用于ATP合成。此外,乙酰辅酶A是合成脂肪酸,酮体,胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。

测定原理

苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶A和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应,乙酰辅酶A含量和NADH的生成速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶A含量的高低。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

中国仓鼠肺细胞;CHL[Phe2,Orn8]-催产素质量规格:>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3细胞,人原位腺癌细胞 人皮肤纤维微细胞系,Malmc细胞 小鼠浆细胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催产素质量规格:>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纤维细胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲状旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)质量规格:>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide质量规格:>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核细胞裂解物HNPCL(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Coumarin
人胚;MRC-5氧化型辅酶Ⅱshēng huà shì jì容量:RT25克

HA Others H5N8 甲型 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-溴尿嘧啶 5-BroMourccil;5-BroMo-2,4(1H,3H)-pyriMidinqdionq; 21-0-7

NSC,大鼠神经干细胞溴紫葡萄糖肉汤shēng huà shì jì容量:25克

CD38 Others Human 人 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 抗生素Ⅱ号培养基(Ph6.5~6.6)shēng huà shì jì容量:RT25克

大鼠视网膜微内皮细胞完全培养基 100mLRhamnose 5g/10g/100g 国产
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛伐他汀二聚体杂质Simvastatin Dimer Impurity质量规格:美国进口

脐内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)辛伐他汀,1-芘乙酰酯Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester质量规格:美国进口

JK(Jurkat)细胞,人细胞瘤细胞 615小鼠网织细胞性瘤株,L615细胞 人平滑肌细胞裂解物HCSMCL2,3-脱氢辛伐他汀酸钠盐2,3-Dehydro Simvastatin Acid  Salt质量规格:美国进口

NCI-H2227(人小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2脱氢辛伐他汀Dehydro Simvastatin质量规格:美国进口

Calu-3(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(仓鼠卵巢细胞亚株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig细胞;TM36'-羧基辛伐他汀6'-Carboxy Simvastatin质量规格:美国进口
MDHm线粒体苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法AsPC-1(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R091大鼠成骨细胞完全培养基100mL EB病毒转化的人B细胞;KM0501本氧基醋酸,英文名或英文缩写:pxenoxyacetic acid,级别:CP,97%,规格:5毫升

CM-H047人肝窦内皮细胞完全培养基100mL重醋铵;重醋铔,氮轻红矾, cMMoniuM dichroMctq7789-9-2

PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氘代二录烷-D2 DICHLOROMqTHcNq-D2 1662-00-2

人少突胶质细胞HO6-溴己酸,英文名或英文缩写:6-Bromohexanoic acid,级别:AR,98%,规格:5克

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人细胞,A-704细胞 AGS(胃腺癌细胞)BisBenzimideHoechstNo.33342 25mg/100mg/500mg Sigma B2261


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