上海联祖生物科技有限公司
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MCA线粒体柠檬酸测试剂盒紫外分光光度法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:100管/96样
  • 货号:LZ-01581S
  • 发布日期: 2021-02-24
  • 更新日期: 2024-09-19
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01581S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 100管/96样
纯度 %
CAS编号
别名 线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒
分子式
是否进口



【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

MCA线粒体柠檬酸测试剂盒紫外分光光度法

100管/96样

微量法

LZ-01581S

商品介绍:

测定意义
乙酰辅酶A广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化,经过这条通路氧化生成二氧化碳和水,释放能量用于ATP合成。此外,乙酰辅酶A是合成脂肪酸,酮体,胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。

测定原理

苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶A和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应,乙酰辅酶A含量和NADH的生成速率成正比,340nm下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶A含量的高低。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)噻乙酸,英文名或英文缩写:2-Aminothiazol-4-acetic acid,级别:USP级,1603u/mg,规格:10KU

H9c2细胞,大鼠心肌细胞 人细胞,HepG2/2-15细胞 CL-0128JeKo-1(人套细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×23-(癸基二基铵)炳烷-1-磺醋内盐 3-(Dqcyldimqthylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12163-36-7

二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-GLYCEROL甘油蛋白组学级无色至几乎无色粘稠液体RTsigma

CD38 Others Human 人 CD38 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺丁基-β-环糊精,英文名或英文缩写:Sulfobutyl-β-Cyclodextrin,级别:高,98%,规格:500U

破骨细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)3240-34-4二乙酰氧基本(Diacetoxyiodo)benzene
SNU-739人细胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS微量可调移液器P2005克

IFNA4 Protein Human 重组人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签)5-溴代水杨醋 5-Bromosclicylic ccid 89-22-4

NCI-H226(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲绿猴肾细胞)L-半胱酸盐酸盐10克RT,避光

NRK-52E,大鼠肾细胞EDTA,3NaN,N'-1,2-基双[N-(羧甲基)-甘酸]三钠盐5克GR,99.5%

CD63 Others Sus scrofa (Pig) 野猪 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) L-xy7noxyproline 1g/5g/10g/25g/100g原装 Aldrich H54409
兔间变表皮鳞株;VX21丙基-β-D-吡喃半乳糖苷ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE质量规格:>98%,BR

人上皮细胞(HPEpiC)(5×105)2-氨基环乙醇2-Aminocyclohexanol  质量规格:>98%,日本原装进口

CL-0131KB(人口腔表皮样癌细胞)5×106cells/瓶×2Y-27632.2HClY27632质量规格:>98%,ROCK1(p160ROCK) 选择性抑制剂

人非小细胞细胞;NCI-H23 大鼠视网膜muller细胞 100mL灵芝酸A(标准品)Ganoderic acid A质量规格:HPLC≥95%,标准品

A549/DDP 肺腺癌/顺铂耐药株蝙蝠葛苏林碱(标准品)Daurisoline质量规格:≥96%,标准品
MCA线粒体柠檬酸测试剂盒紫外分光光度法CM-H049人直肠平滑肌细胞完全培养基100mLA.C.Eformide毛细管电泳级甲先胺测序级100ML1975-2-7Frozen

ACVRL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 三羌基安基烷言醋盐 2-cmino-2-(xy7noxymqthyl)-1,3-propcnqdiol xy7nochloridq 1182-23-1

人星形胶质细胞HAPRE-STAINEDPROTEINMARKER,LOW蛋白Marker电泳级0.5MLFrozen

HL60细胞,人原髓细胞细胞 大鼠瘤细胞,IR983F细胞 角质细胞培养基KM乙酸-α-奈酯25克

MDA-MB-436(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2(荧光染料)
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。


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