资源名称 富养罗尔斯通氏菌培养

种属: Ralstonia eutropha

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

培养基: 营养肉汁琼脂：牛肉膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃，15min。

生长条件: 30℃，好氧

存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

实验内容：
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
保存方法：
传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 。
液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法：
① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

氯化钾英文名称：Potassium chloride规格：100mg轮状病毒PCR检测试剂盒

依那普利拉英文名称：Enalaprilat规格：100mg麻风杆菌PCR检测试剂盒

依那普利双酮英文名称：Enalapril diketone规格：30mg病毒PCR检测试剂盒

马来酸依那普利英文名称：Enalapril maleate规格：30mg马病毒PCR检测试剂盒

盐酸舍曲林英文名称：Sertraline hydrochloride规格：100mg马铃薯Cry3c基因PCR检测试剂盒

苄达赖氨酸杂质A英文名称：Bendazac lysine impurity A规格：50mg马病毒H3N8型PCR检测试剂盒

佐米曲普坦英文名称：R Mi Coopta规格：50mg马病毒1型PCR检测试剂盒

氟比洛芬酯英文名称：Flurbiprofen axetil规格：100mg马病毒4型PCR检测试剂盒

2-单硝酸异山梨酯英文名称：2- isosorbide mononitrate规格：200mg马特定基因序列PCR检测试剂盒

单硝酸异山梨酯英文名称：Isosorbide mononitrate规格：50mg马腺疫链球菌PCR检测试剂盒

甲钴胺英文名称：Mecobalamin规格：50mg猫弓形虫PCR检测试剂盒

托芬那酸英文名称：Tolfenamic acid规格：100mg猫毒PCR检测试剂盒

普伐他汀钠英文名称：Pravastatin sodium规格：100mg猫细小病毒PCR检测试剂盒

盐酸坦洛新英文名称：Tamsulosin hydrochloride规格：100mg猫衣原体PCR检测试剂盒

盐酸英文名称：Two a Flynn hydrochloride规格：100mg毛PCR检测试剂盒

葡萄糖-6-磷酸检测试剂盒亚    型  IgG 　2.5U/L~80U/L

布病检测试剂盒亚    型  IgG 　0~

过氧亚硝基阴离子检测试剂盒亚    型  IgG 　5.625ng/L~180ng/L

p62检测试剂盒亚    型  IgG 　2.5ng/L~80ng/L

S100钙结合蛋白A8检测试剂盒亚    型  IgG 　75pg/mL~2400pg/mL

甘胆酸检测试剂盒亚    型  IgG 　0.25ug/ml~8ug/ml

磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶检测试剂盒亚    型  IgG 　75ng/L~2400ng/L

植酸检测试剂盒亚    型  IgG 　37.5pg/mL~1200pg/mL

植酸酶检测试剂盒亚    型  IgG 　12.5U/L~400U/L

病毒IgG抗体检测试剂盒亚    型  IgG 　0.25ng/mL~8ng/mL

基质金属蛋白酶14检测试剂盒亚    型  IgG 　0.5ng/mL~16ng/mL

免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ检测试剂盒亚    型  IgG 　2.5IU/mL~80IU/mL

细胞色素P4502D6检测试剂盒亚    型  IgG 　0.625ng/ml~20ng/ml

巨细胞病毒检测试剂盒亚    型  IgG 　2.5ng/mL~80ng/mL

单纯病毒抗原1检测试剂盒亚    型  IgG 　0.625ng/mL~20ng/mL
富养罗尔斯通氏菌培养狗肾细胞隆突型；MDCK superdome 培养条件  DMEM/F12(1:1): Ham＇s F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS　

犬肾细胞；MDCK(NBL-2) 培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　

狗肺成纤维样细胞；DogL1 培养条件  McCoy＇s 5A Media (Modified with Tricine)  15%NBS

狗肾细胞；MDCK NS1 培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  10%FBS　    

微生物菌种的培养：
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。