资源名称 BEND培养

种属: Bos taurus, cow│uterus, endometrium

形态: epithelial

提供形式: frozen

安全等级: 2

模式菌株: 未知

培养基: 1:1 mixture of Ham's F12 and Eagle's Minimal Essential medium with Earle's BSS (D-valine modification) with 1.5 mM L-glutamine adjusted to contain 1.5 g/L sodium bicarbonate supplemented with 0.034 g/L D-valine, 10% heat-inactivated fetal bovine serum and 10% heat-inactivated horse serum

传代方法: Volumes used in this protocol are for 75 cm2 flask; proportionally reduce or increase amount of dissociation medium for culture vessels of other sizes. Remove and discard culture medium. Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA solution to remove all traces of serum which contains trypsin inhibitor. Add 2.0 to 3.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes). Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to facilitate dispersal. Add 6.0 to 8.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting. Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels. Incubate cultures at 37°C. Subcultivation Ratio: 1:4 to 1:6 Medium Renewal: Every 2 to 3 days <br>Note: For more information on enzymatic dissociation and subculturing of cell lines consult Chapter 10 in Culture of Animal Cells, a Manual of Basic Technique by R. Ian Freshney, 3rd edition, published by Alan R. Liss, N.Y., 1994.

生长条件: Temperature: 37°C<br>Atmosphere: Air, 95%; Carbon dioxide (CO2), 5%

生长特性: adherent

存储条件: liquid nitrogen vapor phase;Complete growth medium described above supplemented with 5% (v/v) DMSO.  Cell culture tested DMSO is available as ATCC Catalog No. 4-X.

实验内容：
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
保存方法：
传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 。
液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法：
① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

甲氧氯普胺英文名称：Metoclopramide规格：100mg阪崎肠杆菌rpsU-dnaG 基因荧光PCR检测试剂盒间序列(探针法）

六甲蜜胺英文名称：Altretamine规格：100mg包涵体病毒PCR检测试剂盒

萘磺酸右丙氧芬英文名称：Propoxyphene napsylate规格：100mg鼻病毒PCR检测试剂盒

甲泼尼龙英文名称：Methylprednisolone规格：100mg鼻疽假单胞菌PCR检测试剂盒

琥珀酸甲泼尼龙英文名称：Methylprednisolone succinate规格：100mg病毒PCR检测试剂盒

伏格列波糖英文名称：Voglibose规格：100mg病毒PCR基因分型测定试剂盒

甲磺酸氨氯地平英文名称：Amlodipine mesylate规格：100mg丙型病毒PCR检测试剂盒

碳酸钙英文名称：Calcium carbonate规格：100mg伯氏疏螺旋体PCR检测试剂盒

盐酸奈替芬英文名称：Naftifine hydrochloride规格：100mg哺乳动物种属鉴定PCR Mix

硫酸氢氯吡格雷英文名称：Clopidogrel Hydrogen Sulfate规格：100mg布鲁氏菌PCR试剂盒

曲昔匹特英文名称：Troxipide规格：100mg布鲁氏菌核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

氨磷汀英文名称：Amifostine规格：50mg蚕白僵菌PCR检测试剂盒

富马酸喹硫平英文名称：Quetiapine fumarate规格：100mg蚕微粒子病PCR检测试剂盒

赖诺普利英文名称：Lisinopril规格：100mg产肠毒素性大肠杆菌PCR检测试剂盒

维库溴铵英文名称：Vecuronium bromide规格：100mg产毒副溶血弧菌PCR试剂盒

锰超氧化物歧化酶检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MAGED1　5U/mL~160U/mL

免疫球蛋白A检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human Myelin and lymphocyte protein　100μg/mL~3200μg/mL

免疫球蛋白A1检测试剂盒whole cell protein of Mycobacterium bovis　100μg/mL~3200μg/mL

免疫球蛋白D检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MDMX　10μg/mL~320μg/mL

免疫球蛋白E检测试剂盒Mouse IgA protein　15μg/mL~480μg/mL

免疫球蛋白G检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human Mitoferrin 1　0.75mg/mL~24mg/mL

免疫球蛋白G1检测试剂盒KLH conjugated Methamphetamine　0.5mg/mL~16mg/mL

免疫球蛋白G2检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MARCKS　250μg/mL~8000μg/mL

免疫球蛋白G2a检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MAPKAP Kinase 2　125μg/mL~4000μg/mL

免疫球蛋白G2b检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MASP C-terminus　125μg/mL~4000μg/mL

免疫球蛋白G3检测试剂盒KLH conjugated Met Enkephalin peptide (237-241aa)　75μg/mL~2400μg/mL

免疫球蛋白G4检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MLT5　25μg/mL~800μg/mL

免疫球蛋白M检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MSK1 (41-90aa)　50μg/mL~1600μg/mL

免疫球蛋白轻链lambda检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human Mitofilin N-terminus　15U/L~480U/L

缪勒管抑制物质;抗缪勒管激素检测试剂盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human MPP1/EMP55　125pg/mL~4000pg/mL
BEND培养中国仓鼠肺细胞；CHL 培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS

中国仓鼠肺细胞；V79 培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS

中国仓鼠卵巢细胞；CHO-rFVIII-11 培养条件   10%FBS

中国仓鼠卵巢细胞；CHO-K1/CAF13 培养条件   10%FBS    

微生物菌种的培养：
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。