实验内容：
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
资源名称 NCMB 1102 [19291, 20]说明书

种属: Aeromonas salmonicida subsp.‖salmonicida (Lehmann and Neumann) Griffen et al.

分离基物: Salmon, Salmo salar

提供形式: freeze-dried

安全等级: 1

模式菌株: yes

应用领域: Quality control strain<br>Susceptibility disc testing<br>Testing

培养基: Medium 18: Trypticase Soy Agar/Broth

生长条件: Temperature: 20°C<br>Atmosphere: Aerobic
保存方法：
传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 。
液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法：
① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

微生物菌种的培养：
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

大戟二烯醇英文名称：Euphorbia two enol规格：20mg酿酒酵母Y2HGold化学感受态细胞

马钱苷酸英文名称：Loganin acid规格：20mg农杆菌AGL1感受态细胞

竹节参皂苷Ⅳa（暂行）英文名称：Total saponins of Panax japonicus IV A (Provisional)规格：20mg农杆菌EHA105感受态细胞

杨梅苷英文名称：Yang Meigan规格：20mg农杆菌GV3101感受态细胞

α-松油醇英文名称：Alpha terpineol规格：0.1ml农杆菌LBA4404感受态细胞

伪原薯蓣皂苷（暂行）英文名称：Pseudo protodioscin (Provisional)规格：20mg连接转化及筛选

槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-英文名称：Quercetin -3-O- beta -D- glucose -7-O-规格：20mg/支DNA快速连接试剂盒（100）

王不留行黄酮苷英文名称：Semen Vaccariae Huang Tonggan规格：20mgDNA快速连接试剂盒（30）

宝藿苷Ⅰ英文名称：I treasure icariin规格：约20mg/支IPTG干粉

远志口山酮Ⅲ英文名称：Polygala xanthone III规格：约20 mg/支IPTG溶液

细叶远志皂苷英文名称：Saponins of Polygala tenuifolia规格：20mgX-gal干粉

3，6-二芥子酰基蔗糖（暂行）英文名称：3, 6- two mustard acyl sucrose (Provisional)规格：20mgX-gal溶液

23-乙酰泽泻醇B英文名称：23- acetyl Alisol B规格：20mg菌落PCR试剂盒2.0

麦角甾醇英文名称：Ergosterol规格：20mg克必隆常态转化液

5-甲基蜂蜜曲霉素英文名称：5- methyl honey aspergillin规格：10mg克必隆平末端克隆试剂盒(组成型)

霍乱弧菌的选择性分离，后加亚碲酸钾No.4 Agar Base四号琼脂基础     

选择性培养基，沙门氏菌，志贺氏菌的选择性分离Salmonella-Shigella AgarSS 琼脂     

弱选择性培养基，肠道菌的选择性分离Eosin-Methylene Blue Agar伊红美蓝琼脂（EMB）   

肠杆菌科细菌的生化反应筛选（葡萄糖，乳糖，蔗糖）Triple Sugar Iron Agar三糖铁琼脂（TSI）   

选择性培养基，志贺氏菌的选择性培养(FDA标准)Xylose Lysine Desoxycholate AgarXLD 琼脂      

抗生素敏感试验Mueller-Hinton BrothMH 肉汤（MHB）   

抗生素敏感试验Mueller-Hinton AgarMH 琼脂（MHA）   

弱选择性培养基，肠道致病菌的选择性分离China Blue Agar中国蓝琼脂     

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NCMB 1102 [19291, 20]说明书小鼠杂交瘤细胞；2F1 培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

小鼠杂交瘤细胞；4E1 培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

小鼠杂交瘤细胞；4G11 培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

小鼠杂交瘤细胞；4G10 培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS