资源名称 解角质素微杆菌说明书

种属: Microbacterium keratanolyticum

分离基物: 土壤

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: yes

应用领域: 模式菌株

培养基: 营养肉汁琼脂：牛肉膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃，15min。

生长条件: 30℃，好氧

存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

实验内容：
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
保存方法：
传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 。
液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法：
① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

海肾荧光素酶检测系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human SLC16A3 C-terminusWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SLC16A3/MCT4

引物延伸系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human Sema7AWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500Anti-Sema7A/CD108

QuantiFluor ™ ssDNA 系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human SIGLEC10 C-terminusWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SIGLEC10/SLG2

pGL4.37[luc2P/ARE/Hygro]载体系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human SIGLEC11WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SIGLEC11

pGL4.38[luc2P/p53 RE/Hygro]载体系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human SSX5WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SSX5

pGL4.48[luc2P/SBE/Hygro]载体系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human SPON1/F spondinWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SPON1/Fspondin

pGL4.42[luc2P/HRE/Hygro]载体系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human Sortilin/NTR3/Gp95WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-Sortilin/NTR3/Gp95

pGL4.47[luc2P/SIE/Hygro]载体系统KLH conjugated synthetic peptide derived from human SOX10WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200Anti-SOX10

pGL4.44[luc2P/AP1 RE/Hygro]载体系统 KLH conjugated synthetic peptide derived from human nNos/NOS-1 WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 Anti-nNos/NOS-1

pGL4.52[luc2P/STAT5RE/Hygro]载体系统 KLH conjugated synthetic peptide derived from human NCC27 WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=:100-500  IF=1:100-500 Anti-NCC27/CLIC1
解角质素微杆菌说明书人细胞；H1299 培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  优质胎牛血清，10%

人细胞；Romas 培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS　

人急性单核细胞细胞；J-111 培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS

人细胞；Hep-3B2.1-7 培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  10%FBS    

微生物菌种的培养：
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于放线菌孢子的形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。