上海联祖生物科技有限公司
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PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶测试剂盒微量法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LZ-01604S
  • 发布日期: 2020-12-14
  • 更新日期: 2024-09-19
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01604S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 50管/48样
纯度 %
CAS编号
别名 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)测试盒
分子式
是否进口

血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶测试剂盒微量法

50/48

紫外分光光度法

LZ-01604S

商品介绍:

测定意义
PKEC2.7.1.40)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化糖酵解过程中的一步反应,是糖酵解过程中的主要限速酶之一,也是产生ATP的关键酶之一,因此测定PK活性具有重要意义。

测定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PK活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

Sars结构蛋白表达株;293 001B 人肾系膜细胞完全培养基 100mL泛酸测定培养基shēng huà shì jì容量:50张/盒

人表皮色素细胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg肖醋 CHROMIUM(III) nitncTq NONcHYDRcTq 7789--8

小鼠脑膜细胞(MMC)(5×105)聚乙二醇 8000 Poly(ethylene glycol) 8,000 (PEG 8000) 25322-68-3 250G 通用试剂

绵羊肺细胞;OAR-L1大黄根酸shēng huà shì jì容量:100克

小鼠Lewis瘤株;LLT 小鼠前脂肪细胞完全培养基 100mLD-Glucose-6-PhosphateNa2 100mg/500mg/1g/5g Sigma G7250
CM-H024人星状细胞完全培养基100mL三乙醇盐酸盐,英文名或英文缩写:Triethanolamine xy7nochloride,级别:CP,规格:100克

615小鼠株;Ca759 小鼠卵巢上皮细胞完全培养基 100mL Bis(tributyltin) oxidq 26-32-9

细胞名称 种属呋酸,英文名或英文缩写:Furoic acid,级别:BR,规格:5克

EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 人细胞裂解液 (阳性对照) FLUORESCENTSPRINTGEL10%荧光SPRINT NEXT 胶, 10%蛋白组学级100mlRT

SV40T转化的人胚肾细胞;293T(聚乙二醇400)
DLL1 Others Human 人 DLL1 / Delta-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 索非那新琥珀酸盐Solifenacin succinate质量规格:>98%,BR

豚鼠皮肤细胞;GP-S2结晶紫Crystal violet质量规格:BS

NRP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 结晶紫(进口)Crystal violet质量规格:用于生化研究,进口

脑动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)硝基四唑紫(INT)Iodonitrotetrazolium chloride(INT)质量规格:>98%,BR

293T细胞,人胚肾T细胞 人细胞,HO-8910细胞 人心肌细胞裂解物HCML乙基紫Ethyl Violet质量规格:80%,进分
PEPC磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶测试剂盒微量法FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人细胞裂解液 (阳性对照) 改良缓冲蛋白胨水shēng huà shì jì容量:RT10克

主动脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)2,2-二基-1,3-炳二醇;新务二醇 2,2-DiMqthyl-1,3-propcnqdiol;DiMqthyl triMqthylqnq glycol 16-30-7

293001A细胞,Sars蛋白表达株 人癌细胞,MDA-MB-436细胞 雪旺细胞培养基SCM-prf乳胶手套shēng huà shì jì容量:2~8℃250毫克

白牦牛皮肤细胞;Yak-2shēng huà shì jì容量:500毫克

IL35 Others Human 人 IL-35 (IL12A & IL27B) 人细胞裂解液 (阳性对照) 4025-64-33-(酰)本,97%3-(Chlorosulfonyl)benzoic acid

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