传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株；LT012

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:3传代，3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

高铁试剂Ferron  规格：AR,98.5%

高乌甲素（标准品）Lappaconitine  规格：滴定法≥98%，标准品

高香草酸(标准品)Homovanillic306-08-1

高粘度羟乙基纤维素HEC,cellulose

睾酮(标准品)Testosterone  规格：HPLC≥98%标准品

睾酮,睾丸素Testosterone  规格：>98%,BR,可用于细胞培养

告达亭苷元caudatin  规格：HPLC≥98%，标准品

戈米辛D(标准品)Gomisin60546-10-3

格尔德;格尔德美素Geldanamycin  规格：>98%,BR

格列本脲（标准品）Glyburide/Gliebenclamide  规格：HPLC>98%,标准品

格列本脲Glyburide/Gliebenclamide  规格：>99%,BR

格列吡嗪（标准品）29094-61-9

格列吡嗪Glipizide  规格：>98%,BR

格列风内酯（标准品）Griffonilide  规格：HPLC≥98%，标准品

格列喹酮(标准品)Gliquidone  规格：HPLC>98%,标准品

戊比妥标准品Human CT ELISA Kit纯度：0.996

噻咪唑标准品Human FGF9 ELISA Kit纯度：0.95

沙利度标准品Human Fibroblast growth factor 6 ELISA Kit纯度：0.998

四氢唑啉标准品Human Fibroblast growth factor 4 ELISA Kit纯度：0.996

四环素标准品Human bFGF ELISA Kit纯度：0.999

卡因标准品Human Thyroid Ab ELISA Kit纯度：0.995

素标准品Human T4 ELISA Kit纯度：0.995
小鼠杂交瘤细胞株；LT012供应商八角莲 Dysosma versipellis 规格：1g

老蛇莲 The old snake lotus 规格：2g

蚂蚁(棕褐沙蚁) Ants (brown Sha Linyi) 规格：1g

战骨 War bone 规格：8g

土垄大白蚁巢 Nest macrot 规格：3g

榧子 Torreya 规格：3g

香橼（枸橼） Citron (Gou Yuan) 规格：1g

桃仁（山桃） Peach (Prunus) 规格：1g

粘委陵菜 Sticky cinquefoil 规格：1g

陈皮炭 Chen Pitan 规格：0.5g

老鹤草 Cranesbill 规格：2g

橘叶 Orange leaf 规格：3g