传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 杂交瘤细胞株；1A4

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:3传代，3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

里氏木霉Ritonavir分子式：C37H48N6O5S2

梨形毛霉3-O-Acetylandrostenone hydrazone分子式：C21H32N2O2

粉红寄生菌Androstenone hydrazone分子式：C19H30N2O

短密青霉3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one分子式：C21H34O3

米黑根毛霉3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol分子式：C21H32O2

隐甲藻17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one分子式：C21H28O3

浮游球衣菌3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol分子式：C21H34O3

Sphingobacteriumcomposti17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one分子式：C26H30O3

水螺菌5α-Androstane-3β,17β-diol分子式：C19H32O2

沙门氏菌亚种3-O-Methyl-3-methoxymaxterone分子式：C21H36O3

萎蔫短小杆菌3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one分子式：C21H30O2

海藻希瓦氏菌9-Dehydroandrostenedione分子式：C19H24O2

嗜盐细菌属5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal分子式：C21H32O3

睾丸酮丛毛单胞菌3-Amino-5-phenylpyrazole分子式：C9H9N3

新鞘氨醇单胞菌3-Amino-3-phenyl-1-propanol分子式：C9H13NO

蜃楼耶尔森氏菌DL-2-Amino-n-octanoic acid分子式：C8H17NO2

脱氮假单胞菌2-Aminoquinoline分子式：C9H8N2

脱氮付球菌Amoxapine分子式：C17H16ClN3O

桃色欧文氏菌6-Aminoquinoxaline分子式：C8H7N3

丁香假单胞菌6-Aminoquinoline分子式：C9H8N2
杂交瘤细胞株；1A4说明书香叶木素 Diosmetin 规格：HPLC≥98% 20mg/支

羌活醇 Notopterygium alcohol 规格：HPLC≥98% 20mg/支

川芎嗪；四甲基吡嗪 Ligustrazine; four methyl pyrazine 规格：HPLC≥98% 20mg/支

盐酸川芎嗪 Ligustrazine hydrochloride 规格：HPLC≥98% 20mg/支

胡萝卜苷、西托糖苷、谷甾醇-3-O-葡萄 Daucosterol, sitogluside, sitosterol -3-O- grape 规格：HPLC≥98% 20mg/支

钩吻素甲 Gelsemine 规格：HPLC≥98% 20mg/支

钩吻素子;阔胺 Koumine; rich amine 规格：HPLC≥98% 20mg/支

查斯曼林 Chasman Lin 规格：HPLC≥95% 10mg/支

德尔塔林 Del Tarin 规格：HPLC≥98% 10mg/支

光翠雀碱 Denudatine 规格：HPLC≥98% 10mg/支

海柯皂苷元 Hai Ke Zao Ganyuan 规格：HPLC≥98% 10mg/支

塔拉萨敏 Tara SA sensitivity 规格：HPLC≥98% 10mg/支