特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

细胞名称 杂交瘤细胞株；WV-A-01

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:3传代，3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
细胞核提取试剂盒复苏细胞步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。*天换液并检查细胞密度。细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Hoechst33342荧光染料.复苏细胞步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。*天换液并检查细胞密度。细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Hoechst33342染色液(即用型)10ug/ml培养条件：DMEM(高糖)+10%FBS传代方法：1:3～1:6传代,2-3d换液

DiI细胞膜橙色荧光探针特征特性：由MCF7细胞经顺铂耐药筛选得到的细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

Hoechst33342染色液（1mg/mL）.特征特性：与 L Wnt-3A 和 L Wnt-5A 细胞系是亲本细胞系细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

原位细胞凋亡检测试剂盒Roche细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。培养条件：RPMI-1640(含25 mM HEPES)+10%FBS

Hoechst33258荧光染料特征特性：这是P3X63Ag8(ATCCTIB-9)的一个不分泌克隆。Kappa链合成了但不分泌。能抗0.1mM8-氮杂鸟嘌呤但不能在HAT培养基中生长。据报道它是由于缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

脂质体2000Invitrogen原装特征特性：贴壁生长细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

红细胞保存液(阿氏液)特征特性：HCT-8细胞经氟尿嘧啶筛选得到的细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

Hoechst33258染色液(即用型)10ug/ml培养条件：RPMI-1640(含25 mM HEPES) +10%FBS传代方法：1:3～1:6传代,2-3d换液

1％组织细胞固定液特征特性：细胞增殖很缓慢细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

脂质体3000Invitrogen原装特征特性：MCF-7细胞经阿霉素筛选得到的耐药株细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

固定液（2%/2.5%）特征特性：第三代细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

AdenineSulfate腺嘌呤硫酸盐二水合物特征特性：检测到肺表面活性剂蛋白B和C的表达，在裸鼠中历时6-9个月可成瘤，细胞分泌的磷脂响应于佛波醇酯和ATP而不是响应于毛喉素。细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

细胞生物学>细胞分离液特征特性：通过转入SV40基因使细胞永生化，表达细胞角蛋白8和18及波形蛋白，该细胞在裸鼠中没有致瘤性细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

人外周巴细胞分离液特征特性：在裸鼠中可成瘤，p53基因突变细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

人外周巴细胞分离液(FICOLL配制)特征特性：细胞角蛋白阳性；表达CEA、碱性磷酸酶,在裸鼠中能够成瘤细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

小鼠外周巴细胞分离液试剂盒特征特性：检测病毒Ⅰ型(HIV-1)对逆转录酶抑制剂细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

小鼠脾脏淋巴细胞分离液试剂盒特征特性：在HFF-1的基础上转入了SV 40 大T抗原细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

FicollPlus1.077特征特性：细胞保持近梭形、椭圆形、三角形，表面有丰富的微绒毛，细胞呈铺路石样镶嵌排列；细胞表达CK3、CK19、CK14、波形蛋白（Vimentin）、微丝蛋白(F-actin)，微管蛋白(β-tubilin)，细胞增殖细胞核抗原（PCNA），β1-integrin等细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
杂交瘤细胞株；WV-A-01规格BT-549(管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093胎儿真皮成纤维细胞完全培养基100mL 结直肠腺癌细胞;LoVo

EB病毒转化的绒猴淋巴细胞;B95-8

CD40LG Others Rat  CD40L / CD154 / TNFSF5 细胞裂解液 (阳性对照)

MEG-01细胞，成巨核细胞细胞 正常Leydig细胞,TM3细胞 间充质干细胞生长添加物MSCGS

NCI-H23(非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2

小肠隐窝上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

OPCML  *样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体规格： 0.2ml

OPG  骨保护蛋白/护骨素抗体规格： 0.1ml

RANK  核转录因子NF-κB受体抗体规格： 0.2ml

OPGL/ODF  骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子)规格： 0.1ml

OPN  骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)规格： 0.1ml