传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 杂交瘤细胞株；7P1-7

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:3传代，3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

Medium199,PowderGibco细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。培养条件：准备Keratinocyte Serum Free Medium培养基(Keratinocyte Serum Free Medium (K-SFM):GIBCO,货号17005-042, Kit中含有两种添加因子：牛脑脊液提取物（BPE）,表皮生长因子（EGF），培养细胞时添加：0.05 mg/ml BPE，5 ng/ml EGF，10 ng/ml cholera toxi。注意，添加好的培养基不能过滤。（另外，有文献使用DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清）

MCCOY'S5A，withL-Glutamine生长特性：贴壁生长特征特性：该细胞源于一位51岁患有非小细胞黑人男性患者的前的组织，表达C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；该细胞携带K-ras 12突变；p53基因246位密码子突变ATC→ATG；表达PDGF A和B链的异源mRNA；表达TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白 5、8和18阳性，波形蛋白阳性，神经丝蛋白阴性，左旋多巴脱氢酶阴性；据报道，在软琼脂中该细胞形成克隆的效率为9.7%。

B-27?Serum-FreeSupplement(50X),Liquid特征特性：采用脂质体转染的方法，稳定转染CHO细胞野生型AβPPTS1 基因，所得细胞表达野生型AβPPTS1蛋白细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

MCCOY'S5A，withL-Glutamine，with25mMHEPES生长特性：贴壁生长特征特性：该细胞系源自于一名19岁车祸罹难的健康男性的视网膜组织，由Amy Aotaki-Keen建系于1986年。该细胞系表达视网膜色素细胞特有的分子标记如胞内视黄醛结合蛋白和PRE-65。

胰酪胨大豆肉汤培养基TSB培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

半固体琼脂培养基培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

悬浮培养基（SM,2%）培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

Ham'sF-12NutrientMix,powderGibco培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

YPD液体培养基特征特性：细胞耐药分步诱导 待细胞生长稳定后，开始倍增药物诱导剂量，依次为0.125μg/mL、0.25μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL，每个剂量保持培养20天左右。至第8个月末可诱导出对TMZ具有5-8倍耐药的细胞系，并命名为U251 MG/TMZ。细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

阪崎杆菌显色培养基生长特性：贴壁细胞细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

细胞生物学>平衡盐溶液生长特性：贴壁培养特征特性：主动脉内皮细胞（aortic endothelial cells）组成了主动脉内壁，并持续受到血流剪切应力的影响。内皮细胞在切应力的作用下，分泌不同的内皮因子并进而影响收缩和生长。主动脉内皮细胞也调节细胞黏附分子的表达来控制和精确调节反应和组织纤维化。体外培养的原代主动脉内皮细胞可有效地帮助研究者研究内皮功能失调的机理，动脉粥样化等疾病的机理以及发展新的方法。

10×PBS缓冲液(pH7.2-7.4)生长特性：悬浮生长细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

D-Hanks(不含钙镁,不含酚红)培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

D-PBS缓冲液(不含钙镁和酚红)特征特性：该细胞是从一名69岁的白人患者的中分离建立的。该细胞保留了多个分化乳腺上皮的特性，包括：能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成隆突结构（domes）；该细胞表达WNT7B癌基因；TNF-α可以抑制MCF-7细胞的生长；抗雌激素处理能调节细胞胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）的分泌。细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

Hanks，含钙镁，不含酚红（HBSS）培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

D-Hanks，不含钙镁，含酚红（HBSS）细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。培养条件：RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

台氏液生长特性：贴壁生长细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

10xD-Hanks，不含钙镁，不含酚红（HBSS）培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

EBSS，含钙镁，不含酚红培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

EBSS含钙镁含酚红培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
杂交瘤细胞株；7P1-7规格PDCD1 Others Human  PD1 / PDCD1 细胞裂解液 (阳性对照)

CM-R125牙细胞完全培养基100mL

FAIM3 Others Human  FAIM3 细胞裂解液 (阳性对照)

Hep G2细胞，细胞 肾上腺皮质腺癌细胞,SW-13细胞 内根鞘细胞HHIRSC

猪肾细胞;PK-15

小胶质细胞培养基MM

PDI  蛋白质二硫键异构酶抗体规格： 0.2ml

PDK1/PDPK1  3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1抗体规格： 0.2ml

Phospho-PDK1 (Ser241)  磷酸化3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1规格： 0.1ml

Phospho-PDK1 (Tyr373/376)  磷酸化3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1抗体规格： 0.1ml

Pdk4  丙酮酸脱氢酶激酶4抗体规格： 0.1ml