传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0904

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞系来源于一男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

传代方法: 1:2传代；5-6天一次

传代情况: P2

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)N-Acetyl-cysteine质量规格：>98%,BR

N-乙酰-L-丙氨酸Ac-Ala-OH质量规格：98%,BR

N-乙酰-L-丙氨酸N-Acetyl-L-phenylalanine质量规格：>99%,BR

N-乙酰-L-谷氨酰胺N-Acetyl-L-Glutamine质量规格：>98%,BR

N-乙酰-L-赖氨酸/N6-三氟乙酰基-L-赖氨酸N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine质量规格：>98%,BR

N-乙酰-L-酪氨酸N-Acetyl-L-Tyrosine质量规格：0.98

N-乙酰-L-亮氨酸N-Acetyl-L-leucine质量规格：>99%

N-乙酰-L-色氨酸乙酯Ac-Trp-Oet质量规格：HPLC>98%,BR

N-乙酰氨基葡萄糖（标准品）N-Acetyl-D-Glucosamine质量规格：>98%,标准品

N-乙酰甘氨酸N-Acetylglycine质量规格：>98%

N-乙酰磺胺甲恶唑N-Acetyl21312-10-7

N-乙酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脱氧胞苷DMT-Ac-dC质量规格：>98%,BR

N-乙酰基磺胺嘧啶N-Acetyl127-74-2

N-乙酰基咪唑(>98.0%(GC)(T))N-Acetylimidazole质量规格：>98.0%(GC)(T)

N-乙酰两性霉素BN-AcetylB
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0904供应商Pirimicarbsolution　抗蚜威标准溶液(10μg/ml,u=4%)　质量规格：>99%,BR

Pyrazosulfuron　吡嘧磺隆(分析标准品,99%)　质量规格：>99%,BR

Pretilachlor　丙草胺(分析标准品,97.5%)　质量规格：>99%,BR

Pretilachlorsolution　丙草胺标准溶液(10μg/ml,u=2%)　质量规格：>99%,BR

Propoxursolution　残杀威标准溶液(10μg/ml,u=4%)　质量规格：>99%,BR

 Picloram　毒莠定(分析标准品,98.5%)　质量规格：>99%,BR

Pyrimethanil　嘧霉胺(分析标准品,98.5%)　质量规格：>99%,BR

Phenmedipham　甜菜宁(分析标准品,99%)　质量规格：>99%,BR

Metalaxylsolution　甲霜灵标准溶液(10μg/ml,u=6%)　质量规格：>99%,BR

Nitrapyrin　氯草定(标准品)　质量规格：>99%,BR

Profenofos　丙溴磷(标准品)　质量规格：>99%,BR

Pyriproxifen　吡丙醚(分析标准品,98.5%)　质量规格：>99%,BR

Phenthoatesolution　散(0.105mg/ml)　质量规格：>99%,BR

Propanilsolution　敌稗标准溶液(0.100mg/ml)　质量规格：>99%,BR

Phosalone　伏杀硫磷(标准品)　质量规格：>99%,BR