传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 人外周血嗜碱性细胞；KU812

形态特性: 骨髓母细胞

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 从一位慢性髓性患者暴发期的外周血建立了KU812细胞株。这些细胞至少有一个Ph1(费城)染色体。这株细胞有一些嗜碱性细胞的标记(如Fc受体，碱性颗粒，生成组胺)，而淋巴标记阴性。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10%

传代方法: 1:2。3天内可长满。

传代情况: PN5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

NFKB激活蛋白抗体英文缩写：NKAPC25H24O12≥98%

NLE1蛋白抗体英文缩写：NLE1C25H24O12≥98%

磷酸化氧化氮合成酶3（内皮型）抗体英文缩写：Phospho-eNOS (Ser116)C25H24O12≥98%

磷酸化氧化氮合成酶3（内皮型）抗体英文缩写：Phospho-eNOS (Ser615)C20H22O6≥98%

磷酸化氧化氮合成酶3（内皮型）抗体英文缩写：Phospho-eNOS (Ser632)C20H30O3≥95%

增食欲素A/欲激素A抗体英文缩写：Orexin AC22H26N2O4≥98%

增食欲素A/欲激素A抗体英文缩写：Orexin AC15H22O2≥95%

2'-5'-寡腺苷酸合成酶3抗体英文缩写：OAS3C20H32O3≥96.5%

牙齿发育相关蛋白Osr2抗体英文缩写：OSR2C19H20O6≥98%

胚胎干细胞关键蛋白190抗体(N端)英文缩写：Oct-4B(OCT4B-190)NTC22H14O6≥96%

起始识别复合蛋白亚基1抗体英文缩写：ORC1LC20H20O4≥95%

泛素特异性蛋白酶Otubain2抗体英文缩写：OTUBC27H26O3≥90%

精神发育迟滞相关蛋白Oligophrenin-1抗体英文缩写：Oligophrenin 1C12H16O3≥95%

末端多聚腺苷酸2蛋白抗体英文缩写：OGFOD2C25H26O6≥97%

高表达的蛋白1抗体英文缩写：ORAV1C10H12O2≥98%
人外周血嗜碱性细胞；KU812供应商CoenzymeIIreducedtetrasodiumsalt(NADPH)　NADPH;还原辅酶Ⅱ四钠盐;(美仑)　质量规格：>99.0%(GC)

Glucoseoxidase　葡萄糖氧化酶　质量规格：>99.0%(GC)

Lysozyme,fromeggwhite　溶菌酶(蛋清)　质量规格：>99.0%(GC)

Peroxidase,Horseradish(HRP)　HRP;辣根过氧化物酶　质量规格：>99.0%(GC)

Hyaluronidase　透明质酸酶　质量规格：>99.0%(GC)

Aprotinin　抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂)　质量规格：>99.0%(GC)

E64　E-64,蛋白酶抑制剂　质量规格：>99.0%(GC)

AzilsartanMedoxomil　阿齐沙坦酯　质量规格：>99.0%(GC)

α-Amylase　α-淀粉酶　质量规格：>99.0%(GC)

Chymotrypsin　α-糜蛋白酶　质量规格：>99.0%(GC)

AcetylcoenzymeAtrilithiumsalt　乙酰辅酶A三锂盐　质量规格：>99.0%(GC)

Urease　尿素酶,脲酶(巨豆)　质量规格：>99.0%(GC)

ProteasetypeVIII　蛋白酶VIII　质量规格：>99.0%(GC)

TriamcinoloneAcetonide　曲安奈德　质量规格：>99.0%(GC)

TriamcinoloneAcetonide　曲安奈德(标准品)　质量规格：>99.0%(GC)