传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-01

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

传代方法: 1:2传代；5-6天一次

传代情况: P3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

轴突导向因子1抗体英文缩写：Netrin 1C25H26O5≥98%

酪氨酸激酶B抗体英文缩写：TrkBC10H15NO≥98%

跨膜受体蛋白Notch-3抗体英文缩写：Notch3C20H28O4≤90%

中性粒细胞弹性蛋白酶ELANE抗体英文缩写：Neutrophil ElastaseC19H22N2O4≥95%

病毒NS4B（65kDa）抗体英文缩写：Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymeraseC21H26N2O3≥95%

神经生长因子受体相关蛋白1抗体英文缩写：NGFRAP1C21H26N2O4≥96%

死亡结构域蛋白NRH2抗体英文缩写：NRH2C19H22N2O3≥97%

神经丝蛋白抗体英文缩写：Neuronal thread protein AD7c-NTPC15H24O≥97%

磷酸化细胞核因子抗体英文缩写：phospho-NFKB p65(Ser536)C27H45NO2≥98%

跨膜受体蛋白Notch-1抗体英文缩写：Notch1C15H18N2O≥98%

磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体英文缩写：Phospho-NR1D1(Ser55 + Ser59)C16H20N2O≥98%

鸡新城疫病毒抗体英文缩写：Newcastle disease virusC15H18N2O≥98%

还原型辅酶Ⅱ/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸抗体英文缩写：NADPHC64H104O30≥98%

NIT2蛋白抗体英文缩写：NIT2C15H12O4≥98%

神经细胞分化因子1抗体英文缩写：NeuroD1C21H22O9≥95%
EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-01规格TritonX-114　曲拉通X-114　质量规格：>99%,分子生物学级

TritonX-405　曲拉通X-405　质量规格：>99%,分子生物学级

CHAPS　CHAPS;3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸　质量规格：>99%,分子生物学级

CHAPSO　CHAPSO；3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-2-羟基-1-丙磺酸　质量规格：>99%,分子生物学级

1,4-Dithioerythritol　二硫赤藓醇(DTE)；1,4-二硫代赤藓醇　质量规格：>99%,分子生物学级

N'-Nitro-L-arginine-methylesterhydrochloride　N-硝基-L-精氨酸甲酯　质量规格：>99%,分子生物学级

N-Benzoyl-L-tyrosineethylester　N-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)　质量规格：>99%,分子生物学级

AEBSFHCl　AEBSF丝氨酸抑制剂　质量规格：>99%,分子生物学级

AEBSFHCl　AEBSF(进分)　质量规格：>99%,分子生物学级

BestatinHCl　盐酸贝他定(进口)　质量规格：>99%,分子生物学级

1,10-Phenanthrolinehydrochloridemonohydrate　邻菲啰啉盐酸盐，一水　质量规格：>99%,分子生物学级

Phosphoramidondisodiumsalt　膦酰二肽钠　质量规格：>99%,分子生物学级

Decylβ-D-glucopyranoside　癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷　质量规格：>99%,分子生物学级

Dolutegravir,GSK1349572　德罗特韦(GSK-1349572,DTG)　质量规格：>99%,分子生物学级

Dodecylglucopyranoside　十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂酰基喃葡萄糖　质量规格：>99%,分子生物学级