传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0922

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

传代方法: 1:2传代；5-6天一次

传代情况: P2

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

YM-201636YM201636质量规格：>98%,PIKfyve抑制剂

Z-Ala-Ala-Leu-pNAZ-Ala-Ala-Leu-pNA质量规格：>95%,BR

Z-Arg(Mtr)-OH·CHAZ-Arg(Mtr)-OH·CHA质量规格：0.98

Z-L-酪氨酸甲酯Z-Tyr-OMe质量规格：>98%,BR

Zosuquidar；LY335979LY-335979质量规格：>98%

ZSTK474ZSTK474；ZSTK-474质量规格：>98%，I型PI3K亚型抑制剂

α-Apo-土霉素α-Apo-oxytetracycline质量规格：美国进口

α-D-葡萄糖-1-磷酸-二钠(>99.0%,BR)alpha-D-Glucose-1-phosphate,salt,

α－常春藤皂苷（标准品）α-hederin质量规格：供含量测定用

α-促黑激素,黑素皮质素α-MSH质量规格：>95%

α-促黑激素α-MSH质量规格：>95%,BR

α-倒捻子素(标准品)α-mangostin质量规格：HPLC≥98%,标准品

α-淀粉酶α-Amylase质量规格：BR，4000u/g

α-环糊精α-Cyclodextrin质量规格：>98%,BR

α-甲基-L-苯丙氨酸α-Methyl-L-phenylalanine质量规格：98%,BR,一水物
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0922供应商Isoluminol　异鲁米诺(>98.0%(HPLC)(T))　质量规格：>99%,CP

Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl]Oxalate　草酸双[2,4,5-三氯-6-(戊氧羰基)苯基]酯(>98.0%(HPLC))　质量规格：>99%,CP,AR

Disodium8-Amino-1,3,6-naphthalene3sulfonateHydrate　8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二钠盐水合物(>99.0%(HPLC)(T))　质量规格：>99%,CXCR4趋化因子受体拮抗剂

Coumarin102　香豆素102(>97.0%(HPLC)(N))　质量规格：>99%,EP

Coumarin314　香豆素314(>98.0%(HPLC)(N))　质量规格：>99%,EP

FluoresceinChloride　氯化荧光素(>90.0%(HPLC))　质量规格：>99%,EP5.0

2',7'-Dichlorofluorescein　2',7'-二氯荧光素(>95.0%(HPLC))　质量规格：>99%,EP6

2,3-Diaminonaphthalene　2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))　质量规格：>99%,EP6,BR

DimidiumBromide　溴甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))　质量规格：>99%,EP6,BR,可用于细胞培养

7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin　7-(二甲基氨基)-4-甲基香豆素(>95.0%(GC)(T))　质量规格：>99%,EP6.0

7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarin　7-(二甲基氨基)-4-三氟甲基香豆素(>97.0%(GC)(T))　质量规格：>99%,EP6.0,BR

7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylicAcid　7-(二乙基氨基)香豆素-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))　质量规格：>99%,EP6.4,BR

Ethyl6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate　6-[4-(二苯基氨基)苯基]香豆素-3-羧酸乙酯(>98.0%(HPLC))　质量规格：>99%,EP6.8

UranineK　荧光素二钾　质量规格：>99%,GSK-3α/β抑制剂

FluoresceinDiacetate　荧光素二乙酸酯(>98.0%(HPLC))　质量规格：>99%,III型