传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞（傣族）；KM9403

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞来源于一傣族女性的外周血。1994年由中国科学院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

传代方法: 1:2传代；5-6天一次

传代情况: P3

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

D-赤-鞘氨醇C-20D-erythro-Sphingosine6918-49-6

D-虫荧光素钠盐;D-荧光素钠盐D-Luciferinsalt

D-蛋氨酸D-Methionine质量规格：>98%,BR

D-泛醇（标准品）D-Panthenol质量规格：分析标准品

D-泛酸钙,维生素B5D-CalciumB5)

D-泛酸钠Sodium867-81-2

D-甘露糖(标准品)D-Mannose质量规格：HPLC≥98%，标准品

D-高苯丙氨酸D-Homophenylalanine质量规格：>90%(T),BR

D-谷氨酸D-Glutamic6893-26-1

D-谷氨酰胺D-Glutamine质量规格：0.98

D-胱氨酸D-Cystine质量规格：0.98

D-果糖(标准品)D-Fructose质量规格：HPLC≥98%，标准品

D-果糖-1,6-二磷酸三钠盐D-Fructosesodium

D-果糖-6-磷酸二钠盐D-Fructose-6-phosphatesalt

D-果糖D-Fructose质量规格：>99%,BR
EB病毒转化的人B淋巴细胞（傣族）；KM9403价格Elaidicacid　反油酸（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Heptadecanoicacid　十七碳酸（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Heptadecanoicacid　十七碳酸（98%）　质量规格：>98.0%(T)

LeucomalachiteGreen　隐色孔雀石绿（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

MethylArachidate　二十酸甲酯（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Methylricinoleate　蓖麻油酸甲酯（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Methylbehenate　山嵛酸甲酯（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Methyltetracosanoate　二十四烷酸甲酯（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Methylcis-13-docosenoate　芥酸甲酯（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

NonadecanoicAcid　十九酸（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Oleicacid　油酸（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

trans-9-Octadecenoicmethylester　反式-9-十八烯酸甲酯（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

ParaRed　对位红（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

Petroselinicacid　岩芹酸（标准品）　质量规格：>98.0%(T)

D-Panthenol　D-泛醇（标准品）　质量规格：>98.0%(T)