传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 急性髓系细胞细胞；KG-1

形态特性: 原粒细胞

生长特性: 悬浮生长

特征特性: KG1细胞系由H.P.Koeffler和D.W.Golde建立。骨髓抽自一个59岁的患有红而后又发展成急性骨髓原性的男性白人。KG1细胞在形态上类似急性髓原，表现为明显的多形化，骨髓母细胞和骨髓细胞占优势。少量细胞是成熟的粒细胞，也有微量的巨噬细胞和嗜曙红细胞。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

传代方法: 1:3传代,2-3天传一代

传代情况: PN

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

4-硝基-L-苯丙氨酸4-Nitro-L-phenylalanine207591-86-4

4-硝基苄眯盐酸盐4-NitrobenziMidaMide15723-90-7

4-硝基儿茶酚4-NITROCATECHOL质量规格：>98.0%

4-硝基儿茶酚4-NITROCATECHOL质量规格：HPLC>98.0%

4-硝基磺胺甲恶唑4-Nitro29699-89-6

4-硝基邻苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Nitrophthalonitrile质量规格：>98.0%(GC)

4-硝基芘(>97.0%(HPLC))4-Nitropyrene质量规格：>97.0%(HPLC)

4-溴甲基-6,7-二甲氧基香豆素(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin质量规格：>98.0%(HPLC)

4-溴芘(>95.0%(GC))4-Bromopyrene质量规格：>95.0%(GC)

4-亚硝基磺胺甲恶唑4-Nitroso131549-85-4

4-盐酸差向四环素4-Epitetracycline23313-80-6

4-氧代维甲酰酚胺3-Keto865536-65-8

4-氧*度酸4-Oxo111478-86-5

4'-乙酰苯并-15-冠-5-醚(>95.0%(GC))4'-Acetylbenzo-15-crown41757-95-3

4-乙酰氧基它莫西芬4-Acetoxy76117-69-6
急性髓系细胞细胞；KG-1供应商Melezitosehydrate　松三糖　质量规格：>98%,MAO-Bselectiveinhibitor

PEG20000　聚乙二醇20000　质量规格：>98%，MEK1/2抑制剂

2-Aminothiazole　2-氨基噻唑(>98%，BR)　质量规格：>98%,MEK抑制剂

Cerium(III)chloride,heptahydrate　氯化铈七水　质量规格：>98%,MGMT的抑制剂

D(+)-Arabitol　D-阿拉伯糖醇(标准品)　质量规格：>98%,MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂

D(+)-Arabitol　D-阿拉伯糖醇　质量规格：>98%,MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂

Metol　米吐尔(>98%,BC)　质量规格：>98%,p38MAPK抑制剂

Pyridoxalhydrochloride　盐酸吡哆醛　质量规格：>98%,PDE4和TNF-α抑制剂

Siliconeoil　硅油　质量规格：>98%,PI3Kγ/δ抑制剂

Sodiumbromide　溴化钠　质量规格：>98%,PIKfyve抑制剂

Sodiumhexametaphosphate　六偏磷酸钠　质量规格：>98%,Pim1抑制剂

Albumin,frombovinepH7.0Fattyfree　无脂肪酸牛血清白蛋白　质量规格：>98%,PractGrade

Diaphorase　心肌黄酶(>30U/mg,BR)　质量规格：>98%，proteasome抑制剂

Digitonin-water-soluble　水溶毛地黄皂苷　质量规格：>98%,P糖蛋白抑制剂

DSP　DSP　质量规格：>98%,P-糖蛋白抑制剂