传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 人红系细胞；TF-1

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞系1987年由KitamuraT等建立，源于一名35岁日本男性的肝素化骨髓抽取样本，该患者具有严重的全血细胞减少症。细胞生长完全依赖于IL-3或GM-CSF，对IL-5无反应。多种淋巴因子和细胞因子对该细胞都有作用，如：IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。该细胞不表达血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由该细胞的形态和细胞化学特征及珠蛋白基因的组成性表达，显示该细胞属于红系。氯高铁血红素和δ氨基乙酰丙酸诱导细胞合成血红蛋白，TPA刺激细胞向巨噬细胞样细胞分化

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；4mMglutamine；6-8ng/mlGM-CSF

传代方法: 维持细胞浓度在3×104~5×105cells/ml；2~3天换液1次。

传代情况: C6

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

人参皂苷 Rb1 LPhenylalanine methyl ester hydrochloride 质量规格：>99%,BR叉头蛋白D1抗体

羟基积雪草苷 LProline methyl ester hydrochloride 质量规格：>98.5%,BR岩藻糖转移酶11抗体

牛蒡子苷元 LSerine methyl ester hydrochloride 质量规格：>98%,BR干扰素诱导蛋白15抗体

芒果苷 LTryptophan methyl ester hydrochloride 质量规格：>98%,BRRNA结合蛋白9抗体

芦荟甙 LTyrosine methyl ester  质量规格：>98%,BR病毒C亚类受体蛋白FLVCR抗体

黄豆黄苷 LCysteine ethyl ester hydrochloride 质量规格：0.98纤维调节蛋白抗体

京尼平甙 HPheOEt.HCl 质量规格：>98%,BR富含亮跨膜纤连蛋白1抗体

金丝桃苷 Glycine ethyl ester hydrochloride 质量规格：>98%,BR富含亮跨膜纤连蛋白2抗体

积雪草苷 LMethionine ethyl ester hydrochloride 质量规格：>98%(T),BR富含亮跨膜纤连蛋白3抗体

黄芪苷 LTyrosine ethyl ester hydrochloride  质量规格：0.98FAM65B蛋白抗体

槲皮苷 LAspartic acid βbenzyl ester 质量规格：>98%,BR胞外分泌型丝/苏蛋白激酶FAM20C抗体

番泻苷B LGlutamic acid γbenzyl ester 质量规格：0.98四连接同源蛋白FJX1抗体

红景天苷 LPhenylalanine benzyl ester hydrochloride  质量规格：0.98原癌基因FRAT1抗体

6鸟嘌呤核苷 LProline benzyl ester hydrochloride 质量规格：>98%,BR胆汁受体抗体

阿糖胞苷 LArginine Lglutamate 质量规格：>98%,BRFXYD离子转运调节因子6抗体

5溴吲哚N... LArginine AKG 2:1 质量规格：>98%,BRFyn结合蛋白抗体

芸香叶苷 SAcetamidomethylLcysteine hydrochloride 质量规格：>98%,BR锌指蛋白FYCO1抗体
人红系细胞；TF-1说明书BupivacaineHCl　盐酸布比卡因(标准品)　质量规格：>97%,进分

ButenafineHCl　盐酸布替萘芬　质量规格：>97%,进分

Captopril　卡托普利　质量规格：>97%,进分

Captopril　卡托普利（标准品）　质量规格：>97%,进分

(S)-Carbidopa　卡比多巴　质量规格：>97%,进分,SigmaG9910

(S)-Carbidopa　卡比多巴（标准品）　质量规格：>97%,进分,SigmaT4376

ChlormadinoneAcetate　醋酸氯地孕酮（标准品）　质量规格：>97%,进分sigma货号A3656

ChlormadinoneAcetate　醋酸氯地孕酮　质量规格：>97%,进分TCIA2215

CiprofloxacinHCL　盐酸环丙沙星　质量规格：>97%,美国进口

CiprofloxacinHCL　盐酸环丙沙星（标准品）　质量规格：>97%,细胞培养级

Cisatracuriumbesilate　顺苯磺阿曲库铵　质量规格：>97%,液体

Cortisone21-acetate　醋酸可的松　质量规格：>97%,一水物

Cortisone21-acetate　醋酸可的松(标准品)　质量规格：>97%,易氧化

Dantrolenesodium　丹曲林钠　质量规格：>97%,油状

Dantrolenesodium　丹曲林钠(标准品)　质量规格：>97%,游离酸