传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 人急性早幼粒细胞；HL-60

形态特性: 髓母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞由CollinsSJ从一位患有急性早幼粒细胞性的36岁白人女性的外周血中分离建立；可自发分化，或在丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1%to1.5%)、放线菌素D和视黄酸的刺激下发生分化；PMA刺激后可分泌TNF-α。该细胞具有吞噬活性和趋化反应，癌基因myc阳性，表达补体受体和FcR。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)20%FBS

传代方法: 维持细胞浓度在1×105~1×106/ml,每2~3天换液1次。

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

(R)羟基盐... DMannose 质量规格：HPLC≥98%，标准品内质网蛋白29抗体

3羟基杂环盐... NOctanoylNmethylglucamine 质量规格：≥97% ,进分核内切酶G抗体

2,5二... NDecanoylNmethylglucamine  质量规格：>98%,BR真核翻译起始因子2C1抗体

S异脲盐 nOctylβDThioglucopyranoside 质量规格：>98%,BRE1A样分化抑制因子3抗体

DL高半胱内... D(+)Raffinose pentahydrate 质量规格：>98%,BR骨骼肌醇化酶抗体

4盐盐 DSorbitol 质量规格：>98%,BR嗜性粒细胞过氧化物酶抗体

1H唑脒盐盐 NOctylβDglucopyranoside 质量规格：>98%,用于蛋白分析胞吐囊复合体蛋白2抗体

异烟盐盐 L(+)Ribose 质量规格：>98%,BR化eIF4E结合蛋白抗体

美海屈林二盐 L(+)Ribose 质量规格：>98%,标准品MYC启动子结合蛋白1抗体

美金刚盐盐 2DeoxyLribose 质量规格：>98%,BR转录接头蛋白EP300抗体

3,4二肼盐盐 4MethylumbelliferylβDxylopyranoside Printable Reviews 质量规格：0.99内皮脂肪酶抗体

4羧基肼盐盐 2DeoxyDRibose 质量规格：>98%,BR化4E结合蛋白1抗体

3溴肼盐盐 DGalactose 质量规格：HPLC≥98%，标准品化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

2溴肼盐盐 DGalactose 质量规格：≥98%,BR化驱动蛋白样蛋白1抗体

3肼盐盐 Hydrazine dihydrochloride 质量规格：>98%EB病毒核抗原3B抗体

4肼盐盐 Hydroxyapatite 质量规格：>99%,粒径20nm内皮素B受体抗体

4基肼盐盐 Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M 质量规格：粘度112501000mPas附睾蛋白酶抑制蛋白
人急性早幼粒细胞；HL-60供应商Amoxicillin　阿莫西林/羟氨苄青霉素　质量规格：>95.0%(GC)

Amoxicillin　阿莫西林（标准品）　质量规格：>95.0%(GC)

Fenofibrate　非诺贝特　质量规格：>95.0%(GC)

Fenofibrate　非诺贝特（标准品）　质量规格：>95.0%(GC)

Probenecid　丙磺舒　质量规格：>95.0%(GC)

Probenecid　丙磺舒（标准品）　质量规格：>95.0%(GC)

Norfloxacin　诺氟沙星　质量规格：>95.0%(GC)

Norfloxacin　诺氟沙星（标准品）　质量规格：>95.0%(GC)

NorfloxacinHCl　诺氟沙星盐酸盐　质量规格：>95.0%(GC)

NorfloxacinHCl　诺氟沙星盐酸盐（标准品）　质量规格：>95.0%(GC)

Indometacin　吲哚美辛　质量规格：>95.0%(GC)

Indometacin　吲哚美辛（标准品）　质量规格：>95.0%(GC)

Cimetidine　西米替汀　质量规格：>95.0%(GC)

Cimetidine　西米替汀（标准品）　质量规格：>95.0%(GC)

Adefovirdipivoxil　阿德福韦/阿德福韦酯　质量规格：>95.0%(GC)