传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 红色荧光蛋白和萤光素酶标记的人细胞；PLC/PRF/5-Luc2-tdT-4

形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 通过慢病毒感染的方式使PLC/PRF/5细胞稳定表达红色荧光蛋白和萤光素酶融合蛋白Luc2-tdT，通过极限稀释法得到的单。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:2~1:6传代；2~3天换液1次。

传代情况:

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

铍试剂Ⅰ Cyclophosphamide 质量规格：HPLC>99%,标准品小肠钠通道蛋白5抗体

米吐尔 Dexamethasone Acetate 质量规格：>98%,BP,BR,可用于细胞培养APXL蛋白抗体

芥子 Dexamethasone Acetate 质量规格：HPLC>98%,标准品敏感离子通道蛋白3抗体

酞 Trimethoprim 质量规格：>99.5%,超纯,BP2010,BR,可用于细胞培养天门冬β羟化酶抗体

L薄荷 Trimethoprim 质量规格：HPLC>98%,标准品精加压素受体2抗体

DLα Sivelestat sodium  质量规格：含量大于98.5%细胞骨架肌动蛋白样蛋白3抗体

黄原胶 Nevirapine 质量规格：>99%,USP30,BR3号染色体开放阅读框15抗体

8羟基喹哪 Nevirapine 质量规格：HPLC>98%,标准品载脂蛋白B受体抗体

ι角叉菜聚糖 Sulfamethoxazole(SMZ) 质量规格：>99.5%,AR三腺苷结合盒转运蛋白2抗体

K卡拉胶 Sulfamethoxazole(SMZ) 质量规格：HPLC>99%,标准品载脂蛋白B抗体

间羟基 Cefpirome Sulfate 质量规格：>760μg/MG,BR 花生四15脂氧合酶2抗体

D泛钠 Cefpirome Sulfate 质量规格：效价测定受体衔接蛋白抗体

2,3,5三 Amisulpride 质量规格：含量≥900μg/mg，纯度大于99%，USP32载脂蛋白C4抗体

γ亚麻 Amisulpride 质量规格：>98%,标准品原始广泛存在蛋白1抗体

腐殖 Fenofibric acid 质量规格：>98%,BR膜粘连蛋白8抗体

茶 Fenofibric acid 质量规格：HPLC>98%,标准品水通道蛋白8抗体

靛玉红 Moxifloxacin Hydrochloride 质量规格：>99%,BR锚蛋白重复结构域蛋白40抗体
红色荧光蛋白和萤光素酶标记的人细胞；PLC/PRF/5-Luc2-tdT-4说明书澳洲茄边碱20311-51-7英文名：Solamargine  

CAS登录号：20311-51-7

分子式：C45H73NO15

分子量：867.50

分子结构：

规格：20mg/支

纯度：≥ 98%

用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等。

提取来源：龙葵

：、及多种

贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年