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突变型Cas9稳定表达的人细胞;Li-7-mCas9-764说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZX7573
  • 发布日期: 2020-12-07
  • 更新日期: 2024-11-18
产品详请
产地 进口、国产
保存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
品牌 联祖
货号 LZX7573
用途 公司产品仅用于科研
组织来源 详见说明书
细胞形态 上皮样
是否是肿瘤细胞
CAS编号
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 A型
品系 详见说明书
生长状态 贴壁生长
物种来源 详见说明书
包装规格
纯度 %
是否进口

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

产品名称

突变型Cas9稳定表达的人细胞;Li-7-mCas9-764说明书

生长特性

贴壁生长

货号

LZX7573

细胞名称 突变型Cas9稳定表达的人细胞;Li-7-mCas9-764

形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞是采用慢病毒感染的方式使Li-7细胞稳定表达突变型的Cas9蛋白,该蛋白可以降低基因编辑时的脱靶效率,经2.0ug/mlPuromycin筛选得到的单,经WesternBlotting验证该可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;2.0ug/mlPuromycin

传代方法: 1:2传代;2~3天换液1次。

传代情况:

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

 

 

传代方法:

产品仅用于科研收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。

注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。

注意事项:

1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。

3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。

6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。

 

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
PFKP(Humanphosphofructokinase-platelet)ELISAKit人血小板型磷酸果糖激酶  规格:100mg  

UGCG(HumanUDP-glucoseceramideglucosyltransferase)ELISAKit人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶  规格:1.5g  

Casp4(Humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase)ELISAKit人凋亡相关半胱氨酸肽酶4  规格:0.15ml  

PDXK(Humancaspase4-apoptosis-relatedcysteinepeptidase)ELISAKit人吡哆醛/吡哆醇维生素B6激酶  规格:100mg  

DPYSL2(humandihydropyrimidinase-like2)ELISAKit人二氢嘧啶酶样2  规格:20mg/瓶  

SGK2(Humanserum/glucocorticoidregulatedkinase2)ELISAKIT人血清/糖皮质激素调节激酶2  规格:100mg  

MKK6(Humanmitogenactivatedproteinkinasekinase6)ELISAKit人丝裂原活化蛋白激酶激酶6  规格:20mg  

PDXP(Humanpyridoxal/pyridoxinevitaminB6-phosphatase)ELISAKit人吡哆醛/吡哆醇维生素B6磷酸酶  规格:2g  

Tgtp(HumanT-cellspecificGTPase)ELISAKit人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶  规格:0.2g/支  

FDFT1(Humanfarnesyl-diphosphatefarnesyltransferase1)ELISAKit人法尼基二磷酸法尼基转移酶1  规格:100mg  

D-LDH(HumanD-LactateDehydrogenase)ELISAKit人D-乳酸脱氢酶  规格:1g  

Alpha1-AT(HumanAlpha1-Antitrypsin)ELISAKit人α1抗胰蛋白酶  规格:100mg  

KLK1(HumanKallikrein1)ELISAKit人激肽释放酶1  规格:50mg  

KLK6(HumanKallikrein6)ELISAKit人激肽释放酶6  规格:100mg  

PaCoA(HumanPhosphorylatedacetylCoA)ELISAKit人磷酸化乙酰辅酶A  规格:100mg  
突变型Cas9稳定表达的人细胞;Li-7-mCas9-764说明书苍耳亭26791-73-1英文名:Xanthatin  

CAS登录号:26791-73-1

分子式:C15H18O3

分子量:246

分子结构:

外观:白色晶体

规格:20 mg/支

纯度:≥ 98%

用途:用于含量测定/鉴定/药理实验等。

提取来源:菊科植物苍耳Xanthium sibiricum干燥成熟带总苞的果实

溶解性:溶于、、乙醇,微溶于热水,不溶于。

熔点:114.5~115℃

:抗菌、作用。

贮存条件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年

 


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