细胞名称 突变型Cas9稳定表达的人细胞；Hep3b-mCas9-749

形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞是采用慢病毒感染的方式使Hep3b细胞稳定表达突变型的Cas9蛋白，该蛋白可以降低基因编辑时的脱靶效率，经2.0ug/mlPuromycin筛选得到的单，经WesternBlotting验证该可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS；2.0ug/mlPuromycin

传代方法: 1:4～1:6传代，每周换液2次

传代情况:

冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

GlycoproteinVI(Human)ELISAKit人糖蛋白VI  规格：1g  

FS(HumanFollistatin)ELISAKit人卵泡抑素  规格：50mg  

TAb(HumanParathyroidHormoneRelatedProtein)ELISAKit人甲状腺素抗体  规格：20mg  

CA(Humancatecholamine)ELISAKit人儿茶酚胺  规格：100mg  

Cys-C(HumanCystatinC)ELISAKit人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C  规格：冻干粉  

AChRab(Humanacetylcholinereceptorantibody)ELISAKit人乙酰胆碱受体抗体  规格：100mg  

5-HT(Human5-Hydroxytryptamine)ELISAKit人5羟色胺  规格：冻干粉  

INH-A(HumanInhibin)ELISAKit人抑制素A  规格：冻干粉  

SHBG(Humansexhormone-bindingglobulin)ELISAKit人性激素结合球蛋白  规格：3支/套，0.5ml/支  

DHEA-S7(HumanDehydroepiandrosteroneS7)ELISAKit人脱氢表雄酮S7  规格：5g  

DHEA(HumanDehydroepiandrosterone)ELISAKit人脱氢表雄酮  规格：冻干粉  

CGRP(Humancalcitoningenerelatedpeptide)ELISAKit人降钙素基因相关肽  规格：25mg/支  

SS(HumanSomatostatin)ELISAKit人生长抑素  规格：1.5g  

GHRP(HumanGrowthHormoneReleasingPeptide)ELISAKit人生长激素释放多肽  规格：1ml  

INH-B(HumaninhibinB)ELISAKit人抑制素B  规格：0.6g  
突变型Cas9稳定表达的人细胞；Hep3b-mCas9-749规格辛辣内酯A130430-97-6英文名：Pungiolide A  

CAS登录号：130430-97-6

分子式：C30H36O7

分子量：508

分子结构：

外观：白色晶体

规格：20 mg/支

纯度：≥ 98%

用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等。

提取来源：菊科植物苍耳Xanthium sibiricum干燥成熟带总苞的果实

溶解性：溶于、、乙醇,不溶于。

：抗菌、作用。

贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年