传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 Cas9稳定表达的人细胞；Huh7-Cas9-690

形态特性: 上皮样

生长特性: 贴壁生长

特征特性: 该细胞是采用慢病毒感染的方式使Huh7细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单，经WesternBlotting验证该可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。

培养条件: DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS；400ug/mlG418

传代方法: 1:2~1:6传代；2~3天换液1次。

传代情况:

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

HMGB-1(MouseHighmobilitygroupproteinB1)ELISAKit小鼠高迁移率族蛋白B1  规格：20mg  

FVIII-AgELISAKit大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原  规格：10mg  

TFR/CD71(Humantransferrinreceptor)ELISAKit人转铁蛋白受体  规格：20mg  

EL(MouseEndotheliallipase)ELISAKit小鼠内皮脂肪酶  规格：20mg  

CA(Mousecarbonicanhydrase)ELISAKit小鼠碳酸酐酶  规格：20mg  

P53(Humanp53/tumorprotein)ELISAkit人P53  规格：20mg  

FIXELISAKit大鼠凝血因子IX  规格：20mg  

FXELISAKit大鼠凝血因子Ⅹ  规格：20mg  

CGRP(Mousecalcitoningenerelatedpeptide)ELISAKit小鼠降钙素基因相关肽  规格：10mg  

HumanCyclin-D3ELISAKit人细胞周期素D3  规格：20mg  

HumanCyclin-D2ELISAKit人细胞周期素D2  规格：1g  

MTL(MouseMotilin)ELISAKit小鼠胃动素  规格：20mg  

VWFELISAKit大鼠性因子/瑞斯托霉素辅因子  规格：200mg  

PAPELISAKit大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物  规格：120U/支  

SS(MouseSomatostatin)ELISAKit小鼠生长抑素  规格：200mg  
Cas9稳定表达的人细胞；Huh7-Cas9-690价格黄芪皂苷I84680-75-1中文别名：黄芪皂苷甲  

英文名：Astragaloside I  

英文别名：Astragaloside I; Astrasieversianin IV; Cyclosieversioside B  

CAS登录号：84680-75-1

分子式：C45H72O16

分子量：869.04

分子结构：

外观：白色结晶粉末

规格：20mg/支

纯度：≥ 98%

用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等。

提取来源：豆科黄芪的根部提出的有效成分。

熔点：186~187℃

：具有护心、强心，，抑制胶原增生，流变学，，对机体，、抗菌、降压、、、等作用。

贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光

有效期： 2年