上海联祖生物科技有限公司
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LPO脂质过氧化物测试剂盒可见分光光度法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:100管/96样
  • 货号:LZ-01410S
  • 发布日期: 2020-12-02
  • 更新日期: 2024-11-15
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01410S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 100管/96样
纯度 %
CAS编号
别名 线粒体活性氧产生速率(ROS)测试盒
分子式
是否进口

血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

LPO脂质过氧化物测试剂盒可见分光光度法

100/96

荧光法

LZ-01410S

商品介绍:

测定意义
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。

正常情况下,细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态,细胞内活性氧(ROS)水平维持在较低的生理范围;在病理情况下,细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破,细胞内活性氧水平过多,就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸,使机体出现氧化应激,同时,活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤,导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。

因此,通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。

测定原理:

荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜,在线粒体内被酯酶水解,形成无荧光的DCFHDCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF) 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。

需自备的仪器和用品:

多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人细胞裂解液 (阳性对照) N-三苯甲基洛沙坦(洛沙坦杂质H)质量规格:美国进口N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)

软骨细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)洛沙坦-d3质量规格:美国进口Losartan-d3

JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人细胞裂解液 (阳性对照) 羧酸洛沙坦质量规格:美国进口Losartan Carboxylic Acid

615小鼠网织细胞性瘤株;L615洛沙坦质量规格:美国进口Losartan Carboxaldehyde

SK-LU-1细胞,人低分化 大鼠肾成纤微细胞,NRK-49F细胞 CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2MQAE(氯离子荧光探针)质量规格:进分N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide
NCI-H1703[H1703]细胞,人细胞 人细胞,5637(HTB-9)细胞 人视网膜色素上皮细胞HRPEpiCStearicAcid脂蜡酸100克CP,98.5%

貂源细胞1-录代;α-录代 1-Chloroncphclqnq

MMP7 Others Human 人 MMP7 人细胞裂解液 (阳性对照) Fraser添加剂shēng huà shì jì容量:1米

CM-R052大鼠细胞完全培养基100mLRuDP1,5-二嶙酸-D-核酮糖5克BR,98%

RSPO2 Others Human 人 FTLS / RSPO2 (186 Leu/Pro) 人细胞裂解液 (阳性对照) 3153-37-54-录, 98%metxyl 4-chlorobutyrate
人腺泡上皮癌;HPAC灭草烟,咪唑烟酸Imazapyr acid质量规格:>98%

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 咪唑烟酸(标准品)Imazapyr acid质量规格:HPLC>99%,标准品

RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞石胆酸(标准品)Lithocholic Acid质量规格:>97(GC),标准品

rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞 [CIP 104786]细胞 293 [HEK-293] (人胚肾细胞)氧嗪酸钾Potassium Oxonate质量规格:>98%

人T瘤转基因细胞;Jurkat D,E氧嗪酸钾(标准品)Potassium Oxonate质量规格:>98%,标准品
LPO脂质过氧化物测试剂盒可见分光光度法CM-R097大鼠皮下脂肪细胞完全培养基100mLN-叔丁氧羰基-L-酸,英文名或英文缩写:BOC-L-Alanine,级别:BR,99%,规格:25克

CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-录-2,2-二基炳醋 99% 3-CHLORO-2,2-DIMqTHYLPROPIONIC cCID 13211-38-1

小鼠颗粒细胞MGCpotewwiumSULFATE,ANxy7noUS无水钾ACS级白色结晶RTsigma

UI-1细胞,人细胞 大鼠小肠隐窝上皮细胞,IEC-6细胞 人气管平滑肌细胞HTSMC对羟基本乙盐酸盐,英文名或英文缩写:Tyramine xy7nochloride,级别:BR,98%,规格:5克

HOS(人细胞) 5×106cells/瓶×2134-31-68-羟基盐;-8-羟基;氧化;奎诺苏8-xy7noxyinoneoline sulfate;8-inoneopxenol sulfate;Oxine sulfate;inoneosol;Chinosol

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