上海联祖生物科技有限公司
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nadhnadp苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:100管/96样
  • 货号:LZ-01329S
  • 发布日期: 2020-12-01
  • 更新日期: 2024-11-15
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01329S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 100管/96样
纯度 %
CAS编号
别名 NADP苹果酸脱氢酶(NADPMDH)测试盒
分子式
是否进口


【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

NADPMDHNADP苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法

100管/96样

微量法

LZ-01329S

商品介绍:

测定意义
MDH (EC1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH, NADP-MDH主要存在于真核细胞中。

测定原理:

NADP-MDH催化NADPH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
SK-MEL-1(人皮肤色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2TAPS;N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸质量规格:>99%,细胞培养级TAPS

HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2 猕猴皮肤细胞;MMS7PI3K 抑制剂质量规格:>98.5%,进分LY294002

人髓母细胞瘤细胞;D341Med羟乙基磺酸钠质量规格:>98.5%SHES

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) 羟乙基醋酸钾质量规格:>98.5%PHES

MGC-803 人细胞[Tyr8]缓激肽质量规格:>95%,BR[Tyr8] Bradykinin
CM-M015小鼠胰岛细胞完全培养基100mL四氢shēng huà shì jì容量:0.5毫升

IFNA2 Others Mouse 小鼠 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 植酸酶 Phytase from wheat 9001-89-2 5G 通用试剂

小鼠膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL异维A醋 Isotrqtinoin 4729-48-

AtT-20小鼠细胞 AtT-20 mouse pituitary tumor cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS反丁希二酸shēng huà shì jì容量:2~8℃1克

IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 标签)6969-71-7三唑酮1,2,4-Triazolo[4,3-a]pyridin-3(2H)-one
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D3 IV型胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL硫酸长春碱(标准品)Vinblastine Sulfate质量规格:HPLC>98%,标准品

HGC-27人细胞 Human硫酸长春碱(进分)Vinblastine Sulfate质量规格:进分Sigma V1377

CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人细胞裂解液 (阳性对照) 替莫唑胺Temozolomide质量规格:>99%,BR

人小梁网细胞RNAHTMC miRNA5 μg替莫唑胺(标准品)Temozolomide质量规格:HPLC>98%,标准品

ILKAP Others Human 人 ILKAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 氨鲁米特Aminoglutethimide质量规格:>99%,USP30,BR,可用于细胞培养
NADPMDHNADP苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法小鼠网织细胞;M5076 小鼠肠巨噬细胞完全培养基 100mL雷琐辛,英文名或英文缩写:Resorinol,级别:IPC,99%,规格:250毫克

rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞 Rattus肖醋钴;肖醋亚钴;六水合肖醋钴 Cobclfous nitnctq;Cobcltous nitnctq hqxchydrctq 1006--9

SMOC1 Others Human 人 SMOC1 人细胞裂解液 (阳性对照) NEXTGEL12.5%SOLUTIONNEXT GEL 12.5%蛋白组学级透明无色液体RTsigma

EB病毒转化的人B细胞;Mao六扶铝酸,英文名或英文缩写:Ammonium fluoaluminate,级别:CP,41%,规格:5克

PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (5’-1酸腺苷二钠)
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。


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