上海联祖生物科技有限公司
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NADMDHNAD苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:100管/96样
  • 货号:LZ-01327S
  • 发布日期: 2020-11-29
  • 更新日期: 2024-11-15
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01327S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 100管/96样
纯度 %
CAS编号
别名 NAD苹果酸脱氢酶(NADMDH)测试盒
分子式
是否进口

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

NADMDHNAD苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法

100管/96样

微量法

LZ-01327S

商品介绍:

测定意义
MDH (EC1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,细菌中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。

测定原理:

NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
SVEC4-10(小鼠结内皮细胞) 5×106cells/瓶×2奥美拉唑N-氧化物质量规格:美国进口Omeprazole N-Oxide

HDLEC-c 人类皮肤管内皮细胞(HDLEC)来自成年捐献者 500,000cells 颌下腺上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)4-去甲氧基-4-硝基奥美拉唑硫化物质量规格:美国进口4-Desmethoxy-4-nitro Omeprazole Sulfide

视网膜微内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)5-羟基奥美拉唑钠盐质量规格:美国进口5-Hydroxy Omeprazole  Salt

GPA33 Others Human 人 GPA33 / Glycoprotein-A33 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-O-去甲基奥美拉唑硫化物质量规格:美国进口5-O-Desmethyl Omeprazole Sulfide

NRK 大鼠肾细胞奥氮平内酰胺杂质质量规格:美国进口Olanzapine Lactam Impurity
HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2司盘85shēng huà shì jì容量:1克

hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 人类外周血CD14+单核细胞团块单一来源,预选型 > 1 mio.cells 人脊髓星形胶质细胞RNAHA-sp miRNA5 μg蔗糖酶 Invertase 9001-57-4 250MG 通用试剂

CM-M010小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基100mL异数李速 Isorhcmnqtin 480-19-3

KIAA1279 Others Human 人 KIAA1279 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Theophylline1,3-二甲基2KU高,98%

肾系膜细胞培养基MCM555-06-6对基本钠4-AMINOBENZOIC ACID wo7ium SALT
CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸粘杆菌素(标准品)Colistin Sulphate质量规格:效价测定

HMF 人肌肉组织来源细胞盐酸依氟鸟氨酸Eflornithine HCl质量规格:>98%,水合物

CM-R019大鼠腮腺细胞完全培养基100mL色甘酸钠Cromolyn 质量规格:>99%,USP32,BR,可用于细胞培养

RBE, 人肝细胞色甘酸钠(标准品)Cromolyn 质量规格:HPLC>98%,标准品

EB病毒转化的人B细胞;KMY1022 人神经星形胶质细胞完全培养基 100mL环孢菌素,环孢素A,环孢霉素ACyclosporine A质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养
NADMDHNAD苹果酸脱氢酶测试剂盒微量法BT-549(人管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093小鼠胎儿真皮成纤维细胞完全培养基100mL 人结直肠腺癌细胞;LoVo皮质甾酮,英文名或英文缩写:Corticosterone,级别:CP,99%,规格:100克

EB病毒转化的绒猴细胞;B95-8醋锑 cntimony triccqtctq 693-2-0

AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) PROTEASEINHIBITORCOCKTAIL,BACTERIAL蛋白酶抑制剂混合物,细菌蛋白组学级白色粉末FROZENsigma

CL-0209SHZ-88(大鼠癌细胞)5×106cells/瓶×2偏硼酸,英文名或英文缩写: borate monohydrate,级别:BR,98%,规格:500克

3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞 小鼠细胞,HEPA1-6细胞 FO瘤细胞)AMVReverseTranscriptase 300u/1000u Promega原装
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

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