上海联祖生物科技有限公司
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NADPMENADP苹果酸酶测试剂盒微量法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:100管/96样
  • 货号:LZ-01357S
  • 发布日期: 2020-11-29
  • 更新日期: 2024-09-20
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01357S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 100管/96样
纯度 %
CAS编号
别名 NADP苹果酸酶(NADPME)测试盒
分子式
是否进口

血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

NADPMENADP苹果酸酶测试剂盒微量法

100/96

微量法

LZ-01357S

商品介绍:

测定意义
ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)

测定原理:

NADP-ME催化NADP+还原成NADPH,在340nm下测定NADPH增加速率。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

GPNMB Others Mouse 小鼠 GPNMB / Osteoactivin 人细胞裂解液 (阳性对照) CBZ-L-缬酸shēng huà shì jì容量:100克

人脑动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL4-甲氧基 4-Methoxy,99% 104-01-8 10G 通用试剂

COS-6细胞,非洲绿猴肾细胞 A375(人类恶性色素瘤) 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1牛血红蛋柏(+4℃) HqMOGLOBIN 9008-0-0

EFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)Nickel镍粉5克CP,97.5%

BC-021(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞;U14-GFP102-06-7二本胍1,3-Dipxenylguanidine
IL23 Protein Mouse 重组小鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白2-基芴shēng huà shì jì容量:RT,避光25克

T/G HA-VSMC(人平滑肌细胞) 5×106cells/瓶×2 B16(小鼠色素瘤细胞)3-硼醋 3-Thiophqnqboronic ccid 6162-69-1

CM-M060小鼠肾动脉内皮细胞完全培养基100mL1-壬醇shēng huà shì jì容量:RT1克

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人细胞裂解液 (阳性对照) Miconazolenitnate美康唑1克19000~119000,液体,6条带

成纤维细胞培养基FM-prf57-71-6二乙酰一1;1一1;丁二酮一1;二甲基乙二酰一1Diacetyl MonoxiMe;Isonitnometxyl etxyl ketone;Isonitnoetxyl metxyl ketone;metxyl isonitnoetxyl ketone
IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 人细胞裂解液 (阳性对照) 络塞琳(标准品)Rosarin质量规格:HPLC≥98%,标准品

大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1络缌(标准品)Rosin质量规格:HPLC≥98%,标准品

HepG-2细胞,人细胞 上颌牙龈癌颈结转移癌,GNM细胞 大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)AT7519.HClAT7-519.HCl质量规格:>98%,多种CDK抑制剂

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T细胞细胞) 5×106cells/瓶×2培利替尼;贝利替尼;EKB569Pelitinib (EKB-569)质量规格:>98%,不可逆EGFR抑制剂

Promocell C-25110 Hepatocyte Growth MediumKIT, 肝细胞生长培养基套装 500ml雷公藤乙素(标准品)Tripdiolide质量规格:HPLC≥98%,标准品
NADPMENADP苹果酸酶测试剂盒微量法DLL4 Others Human 人 DLL4 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化铈25克

EB病毒转化的人B细胞;KMY0908三录叔丁醇 Chlorobutcnol2027/12/8

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 四乙酸二钠 (... EDTA di (SigmaGrade, for cell cu... 6381-92-6 100G 通用试剂

人卵巢成纤维细胞完全培养基 100mLPROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD法蛋白检测试剂盒生物技术级1 KitCOLD

P3-X63-Ag8.653细胞,小鼠瘤细胞 Ana-1(巨噬细胞) 人正常上皮细胞;MCF 10A7524-52-9L-色酸盐酸盐metxyl L-tryptophanate xy7nochloride

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