PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

嗜碳芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus carboniphilus

蝙蝠蛾拟青霉拉丁属名: Paecilomyces hepiali

细链格孢注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

葡萄座腔菌拉丁属名: Botryosphaeria dothidea

喉病毒拉丁属名: Infectious       laryngotracheitis virus

美味侧耳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

马赛菌拉丁属名: Massilia eurypsychrophila

汉逊德巴利酵母汉逊变种拉丁属名: Debaryomyces hansenii var. hansenii

Mycobacterium phocaicum 用途：研究 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究 特征特性：TSA培养基，30℃培养24 h，菌体杆状，0.6-0.7 μm × 3.0-8.2 μm，单个或成对排列，革兰氏阳性。菌落乳脂色，圆形，不透明，边缘整齐。

产品名毛木耳 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Auricularia 种名加词：polytricha (Mont.) Sacc. 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教学 具体用途： 特征特性：子实体一般较大, 胶质，浅圆盘形、耳形或不规则形，直径2-15 cm，有明显基部，无柄，基部稍皱，新鲜时软，干后收缩。子实层生里面，平滑或稍有皱纹，紫灰色，后变黑色。外面有较长绒毛，无色，仅基部褐色，长400-1100μm×4.5-6.5μm，常成束生长。担子棒状

果生链核盘菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

球毛壳拉丁属名: Chaetomium globosum

小马勃注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

炭黑曲霉拉丁属名: Aspergillus  carbonarius

类干酪乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus paracasei

刺盘孢菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

屎肠球菌拉丁属名: Enterococcus faecium
加州立克次体探针法荧光定量PCR试剂盒说明书预染蛋白Marker分子量标准(10-250kDa) 10次 MBI分装

ZNF230 英文名称： 锌指蛋白230 0.2ml

DACH1 英文名称： 细胞命运决定因子DACH1 0.2ml

GOLM1 GOLM1 / GP73 鼠单抗 (FITC) Human

DSN1 英文名称： 着丝粒相关蛋白DSN1 0.2ml

Apelin receptor Anti-Apelin receptor/APJ receptor 0.1ml

Anti-HBsAg/FITC 荧光素标记小鼠抗人表面抗原IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CD31 英文名称： 血小板内皮细胞黏附分子1 0.1ml

Anti-EphA4 R 酪氨酸蛋白激酶A4受体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

BLC-1/CXCL13(Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1) ELISA Kit 人B-淋巴细胞趋化因子Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-fowl typhoid and pullorum disease 鸡白痢、鸡伤寒Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/APC APC标记的小鼠抗兔IgG 规格 0.1ml

CS(Human chondroitin sulfate) ELISA Kit 人软骨素 96T

SLC37A4 英文名称： 葡萄糖-6磷酸转运蛋白 0.2ml

EGF 英文名称： 小鼠抗表皮生长因子 0.1ml

蛋白磷酸酯酶-1 Anti-PP-1 0.1ml

Anti-Astrocyte/FITC 荧光素标记兔抗人星形胶质细胞IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Mst1(Thr183) 磷酸化蛋白激酶MST1 规格 0.1ml

GR (Glucocorticoid receptor) 糖皮质激素受体 多肽Multi-class antibodies规格： 0.5mg

大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒英文名称：Rat sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit特价促销

大鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA试剂盒英文名称：Rat thymus activation regulated chemokine,TARC ELISA Kit特价促销

CSFV 英文名称： 病毒 0.1ml

Anti-E.coli/EPEC 抗普通大肠埃希菌菌体蛋白Multi-class antibodies规格： 0.1ml

IGF- II 小鼠样生长因子-ⅡMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-Pyk2 (Tyr881) 磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/PE PE标记的小鼠抗大鼠IgG 规格 0.1ml

Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit 人羟脯酸 96T

SARS S-protein 英文名称： 抗表面S蛋白 0.1ml