上海联祖生物科技有限公司
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鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4331
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-12-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4331
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

规格

货号

鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

50T

LZR4331

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

根瘤菌用途: 固氮

乳杆菌属拉丁属名: Lactobacillus  sp.

松口蘑注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

岛青霉拉丁属名: Penicillium  islandicum

宛氏拟青霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

潘诺尼亚锁霉拉丁属名: Itersonilia pannonica

卵形巴贝斯虫(卢氏株)拉丁属名: ovata

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis

产肠毒素大肠埃希氏菌拉丁属名: Escherichia  coli ETEC O25:K19

金黄色葡萄球菌拉丁属名: aureus

产气荚膜梭菌 毒素A型拉丁属名: perfringens Type A

葛氏沙雷氏菌拉丁属名: Serratia  grimesii

荧光威克酵母用途: 模式菌株

层出镰孢菌拉丁属名: Fusarium proliferatum

宇佐美曲霉拉丁属名: Aspergillus  usamii
鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明书英文名称:  0.2ml

AVEN 英文名称: 细胞死亡调节蛋白(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂) 0.1ml

Anti-Aurora B/FITC 荧光素标记极光激酶BIgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

EphA2 英文名称: 内皮细胞受体蛋白酪酸激酶 0.1ml

核糖核蛋白抗原SSA Anti-SSA/RO 0.1ml

Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 荧光素标记磷酸化生成素受体2IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8 规格 0.1ml

CDC37L1 英文名称: 细胞分裂周期37样蛋白1 0.2ml

Anti-FGFR3/CD333 成纤维细胞生长因子受体3Multi-class antibodies规格: 0.2ml

MIP-1 Gamma 小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1γMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-factor VIII(FVIII) 第八因子相关抗原Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MRC1/CD206 巨噬细胞甘露糖受体 规格 0.2ml

VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit 人维生素D受体 96T

STK25 英文名称: 丝酸/苏酸激酶25 0.2ml

EDNRA 英文名称: 内皮素受体A 0.1ml

孕激素诱导阻断因子 Anti-PIBF 0.2ml

Anti-STAT3 /FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子3IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MYL6(Tyr29+Ser30) 磷酸化肌球蛋白轻链6 规格 0.1ml

GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖转运蛋白2(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg

人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒 英文名称:Human serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit进口/分装

人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA试剂盒 英文名称:Human serine protease,PRSS ELISA Kit特价供应

Cyclin E 英文名称: 周期素E 0.1ml

Anti-NKG2D/CD314 NK细胞受体2DMulti-class antibodies规格: 0.2ml

M-CSF ELISA Kit 大鼠巨噬细胞集落刺激因子Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-phospho-Akt/FITC 荧光素标记抗磷酸化蛋白激酶BIgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FBXL15 FBXL15蛋白 规格 0.2ml

PGF2 Alpha ELISA Kit 大鼠素F2α 96T

PRAK 英文名称: p38调节/激活蛋白激酶 0.2ml

 


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