上海联祖生物科技有限公司
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杏仁源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4325
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-12-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4325
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

规格

货号

杏仁源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

50T

LZR4325

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

大斑凸脐蠕孢拉丁属名: Exserohilum turcicum

枯草芽孢杆菌枯草亚种拉丁属名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

葡萄座腔菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

短小芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  pumilus

菊池链格孢用途: 植物病原物,为该病防治提供依据。

链球菌(不定种)拉丁属名: sp.

大肠埃希氏杆菌拉丁属名: Escherichia  coli

蜡样芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus cereus

罗伦隐球酵母罗伦变种拉丁属名: Cryptococcus laurentii var. laurentii

谷氨酸棒杆菌拉丁属名: Corynebacterium  glutamicum

瘿青霉拉丁属名: Penicillium fellutanum

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

顶青霉拉丁属名: Penicillium corylophilum

白灵侧耳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

干酪乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus casei
杏仁源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 DLP1 英文名称: 动力相关蛋白1 0.1ml

Anti-Acinus AcinusMulti-class antibodies规格: 0.2ml

EpCAM 英文名称: 上皮细胞粘附分子 0.1ml

钙介质素 Anti-caldesmon 0.1ml

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462)/FITC 荧光素标记磷酸化马铃薯球蛋白(性硬化)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化热休克蛋白27 规格 0.1ml

cath-L/CL peptide 组织蛋白酶L抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Cdc23 英文名称: 细胞分裂周期蛋白23 0.2ml

Anti-Gastrin 胃泌素/蛙皮素Multi-class antibodies规格: 0.1ml

CTX- I (Human C-telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型胶原C端肽Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Phospho-HSL (Ser552) 磷酸化荷尔蒙敏感脂肪酶Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MATK 酪氨酸蛋白激酶细胞分裂素 规格 0.2ml

GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶 96T

RNF15 英文名称: 环指蛋白15 0.2ml

ASIC3 英文名称: 酸敏感离子通道蛋白3 0.1ml

Anti-Ack1/FITC 荧光素标记Ack1IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen) ELISA Kit 小鼠第八因子相关抗原Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-CD57/FITC 荧光素标记抗CD57IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh DPY19L2 DPY19L2蛋白 规格 0.2ml

TOXO IgG 弓形虫 IgG(间接法二步法)

Mineralocorticoid receptor 英文名称: 盐皮质激素受体 0.2ml

Cyclin B1 英文名称: 周期素B1 0.1ml

Anti-Nm23-H1 抑制基因Multi-class antibodies规格: 0.1ml

poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受体Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-phospho-c-Raf (Ser259) 磷酸化原癌基因c-RafMulti-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HACE1 E3泛素蛋白连接酶HACE1 规格 0.2ml

C4(Mouse Complement 4) ELISA Kit 小鼠补体蛋白4 96T

PAFR 英文名称: 血小板活化因子受体 0.1ml

 


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