PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
以下列是公司正在热销的产品：

球黑孢菌拉丁属名: Khuskia oryzae H.J. Huds.

异常毕赤酵母拉丁属名: Pichia anomala

蜡样芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  cereus

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae Hansen

水稻纹枯病（立枯丝核菌）拉丁属名: Thanatephorus cucumeris

黑曲霉拉丁属名: Aspergillus  niger

阪崎氏年轻泰坦杆菌(阪崎克罗诺杆菌) 拉丁属名: Cronobacter  sakazakii

亮白曲霉拉丁属名: Aspergillus  candidus

戊糖乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus pentosus

嗜热脂肪地球芽胞杆菌拉丁属名: Geobacillus   stearothermophilus

克鲁斯假丝酵母拉丁属名: Candida  krusei

葡枝根霉拉丁属名: Rhizopus  stolonifer

腊状芽胞杆菌用途: 产蛋白酶

大肠埃希菌拉丁属名: coli

土味链霉菌拉丁属名: Streptomyces odorifer
小鼠源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明书IL-2 ELISA KIT 小鼠白介素2 96T

TSHB 英文名称： 小鼠抗促甲状腺素 0.1ml

C6orf57 英文名称： 6号染色体开放阅读框57 0.2ml

Anti-Phospho-Met (Tyr1349) 磷酸化肝细胞生长因子受体(原癌基因)Multi-class antibodies规格： 0.1ml

小鼠8异素(8-iso-PG)ELISA试剂盒英文名称：Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit进口/分装

小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) ELISA试剂盒英文名称：Mouse Collagen Type Ⅰ,Col ⅠELISA Kit进口/分装

小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit特价供应

CDC16 英文名称： 细胞分裂周期蛋白16 0.2ml

Anti-Phospho-cdc2 (Thr14) 磷酸化周期素依赖激酶2Multi-class antibodies规格： 0.1ml

TPO(Thyroid Peroxidase) 甲状腺过氧化物酶(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化细胞分裂周期蛋白25CMulti-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh ORP8 氧化固醇结合蛋白8 规格 0.2ml

IGFBP7 Kit Human 人 IGFBP7 ELISA配对 ELISA

phospho-TRIM25(Ser100) 英文名称： 磷酸化雌激素反应指状蛋白 0.1ml

PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 尿激酶型纤溶酶原激活因子(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-AVPR2 精氨酸加压素受体2Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-AKT2 (Ser474) 磷酸化蛋白激酶B2 规格 0.1ml

Myeloperoxidase 浓缩液 0.1ml 进口分装

UGDH 英文名称： 尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶 0.2ml

DNAJC3 英文名称： 干扰素诱导蛋白p58ipk 0.1ml

Anti-AVPR2 精氨酸加压素受体2Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CYBR1 英文名称： 细胞色素B还原酶1 0.2ml

Anti-Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白Multi-class antibodies规格： 1ml

Human desmin,Des ELISA Kit 人结蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-SSB/La 干燥症SSB/LaMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/Bio 生物素标记的羊抗人IgM 规格 0.1ml

Lp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2 96T

Proprotein Convertase 2 英文名称： 神经转化酶2 0.1ml