客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

恶臭假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas putida

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

樟疫霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

葡萄球菌属拉丁属名: Staphylococcus  sp.

大肥菇拉丁属名: Agaricus bitorquis

假单胞菌属拉丁属名: Pseudomonas avellanae

链霉菌拉丁属名: Streptomyces sp.

阴沟肠杆菌拉丁属名: Enterobacter cloacae

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

血链球菌拉丁属名: Streptococcus sanguinis

短裙竹荪2-1注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

肿大地杆菌拉丁属名: Terrabacter tumescens

白色念珠菌拉丁属名: Candida albicans

茶盘长孢*拉丁属名: Gloeosporium theae-sinensis T. Miyake

杂色曲霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用
虾源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Claudin 16 英文名称： 紧密连接蛋白16 0.1ml

Anti-CTR1/Calcitonin receptor 降钙素受体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

NT-3 人神经营养素-3Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Cyclin D1 周期素D1Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NFX1 核转录因子X盒结合蛋白1 规格 0.2ml

Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子 96T

TNF-alpha(1F6) 英文名称： 坏死因子-α单克隆 0.1ml

CDC10 英文名称： 细胞周期调控因子10 0.2ml

Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171) 磷酸化CREB转录共激活因子TORC2Multi-class antibodies规格： 0.1ml

REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基因蛋白IVMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-PAK2(Ser141) 磷酸化p21激活激酶2Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HPCL2 植烷酰辅酶A羟化酶2 规格 0.2ml

APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit 人抗磷脂酰丝酸 96T

Phospho-PKM2 (Tyr105) 英文名称： 磷酸化酸激酶M2 0.1ml

小鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit特价促销

小鼠可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒英文名称：Mouse soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit特价促销

小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒英文名称：Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit特价促销

cAMP 人环-磷酸腺苷Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-CK15 细胞角蛋白15Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NSE/ENO2/γ Enolase 神经元特异性烯醇化酶 规格 0.1ml

Freund's Adjuvant Complete 弗氏完全佐剂(美国SIGMA) 10ml

CXorf21 英文名称： X染色体开放阅读框21 0.2ml

Anti-fatty acid elongase 脂肪酸延长酶Multi-class antibodies规格： 1ml

human-VEGF-D 大鼠内皮生长因子DMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-DP-I 桥粒斑蛋白1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NARF 核纤层蛋白A识别因子 规格 0.2ml

Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit 人凝血因子Ⅱ 96T

phospho-SLC29A4 (Tyr198) 英文名称： 磷酸化脑质膜单胺转运蛋白PMAT 0.1ml