- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR4318
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2024-12-19
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR4318 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 规格 | 货号 |
鸵鸟源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格 | 50T | LZR4318 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
嗜线虫致病杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
节杆菌拉丁属名: Arthrobacter humicola
苏云金芽胞杆菌用途: 用于抗虫基因的分离和抗虫相关基础研究。
球孢白僵菌用途: 生物防治
酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
Bacillus vireti拉丁属名: Bacillus vireti
猴头菇拉丁属名: Hericium erinaceus
青霉拉丁属名: Penicillium sp.
酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
根杆菌拉丁属名: Rhizobacter fulvus
苏云金芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus thuringiensis
禾谷丝核菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
根霉属拉丁属名: Rhizopus sp.
酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
假单胞菌用途: 用于降解甲萘威
鸵鸟源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒 英文名称:Rat Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA Kit进口/原装
phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 ) 磷酸化神经生长相关蛋白43抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
CLU Clusterin / Apolipoprotein J / Apo-J 鼠单抗 (FITC) Human
Rhesus antibody Rh phospho-DAXX (Ser671) 磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白 规格 0.1ml
尼龙膜(带正电荷)(15×60cm 0.45um) 1张 Pall-Gelman
ZNF231 英文名称: 锌指蛋白231 0.2ml
DDB2 英文名称: DNA损伤结合蛋白2 0.1ml
CDAN1 英文名称: 先天性红细胞生成异常性蛋白1 0.2ml
Anti-FOS B FosB蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml
TH1/TH2 小鼠细胞内细胞因子Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-FABP(brain) CT 脑型脂肪酸结合蛋白(C端)Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MRF/C11orf9 髓鞘基因调控因子 规格 0.2ml
MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone) ELISA Kit 人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素 96T
SLC44A1 英文名称: 溶质转运蛋白家族44成员1 0.2ml
proCNP/NPPC (pro-natriuretic peptide) 促尿钠排泄肽前体C抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-AQP7 水通道蛋白-7Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATG4C(Ser166) 磷酸化自噬相关蛋白4C 规格 0.1ml
山羊抗小鼠 IgG(H+L)/HRP 0.1ml 美国Jackson公司分装
Uromodulin 英文名称: TH糖蛋白 0.2ml
DNA polymerase alpha 英文名称: DNA聚合酶α 0.2ml
Anti-AQP7 水通道蛋白-7Multi-class antibodies规格: 0.2ml
CXCR7 英文名称: 细胞表面趋化因子受体7 0.1ml
Anti-phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BMG/ Beta2-MG(Human Beta2-microglobulin) ELISA Kit 人β2微球蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-MK6 (Ser202) 磷酸化原活化蛋白激酶MKK6Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Hsp93 植物热休克蛋白93 规格 1ml
PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit 人抗多发性肌炎 96T
PTF1A 英文名称: 胰腺特异转录因子PTF1A 0.1ml