上海联祖生物科技有限公司
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鼠源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4314
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-09-14
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4314
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

规格

货号

鼠源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格

50T

LZR4314

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

*芽胞杆菌(Bacillus atrophaeus)ATCC 9372;(曾用名:枯草芽胞杆菌黑色变种)规格: 10ml

炭黑曲霉拉丁属名: Aspergillus  carbonarius

松生茎点霉拉丁属名: Sydowia polyspora

长双歧杆菌拉丁属名: Bifidobacterium  longum

鸭疫里氏杆菌拉丁属名: anatipestifer

毕赤酵母用途: 高效发酵 植酸酶

耐冷冷杆菌拉丁属名: Cryobacterium  psychrotolerans

香菇注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

膜醭假丝酵母拉丁属名: Candida membranifaciens

咸海鲜芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  jeotgali

病毒拉丁属名: Infectious       bronchitis virus

弗雷德里克斯堡假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas frederiksbergensis

紫红曲霉拉丁属名: Monascus purpureus

环形泰勒虫(安西株)拉丁属名: annulata

中间根瘤菌属拉丁属名: Mesorhizobium  shangrilense
鼠源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格ABCD4 英文名称: 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白4 0.2ml

Anti-CD8/RBITC 罗丹明标记CD8IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

aFGF-1 ELISA Kit 大鼠酸性成纤维细胞生长因子1Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-phospho-APP(phospho Thr668) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白(p-APP Thr668)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM46D/CT112 /抗原112 规格 0.2ml

IL-1(Human Interleukin 1) ELISA Kit 人白介素1 96T

MLCK 英文名称: 肌球蛋白轻链激酶 0.1ml

CD94/KLRD1 英文名称: NK细胞表面抑制性受体CD94 0.2ml

Anti-NKG2C NK细胞受体2CMulti-class antibodies规格: 0.2ml

BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受体1AMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-MPO 髓过氧化物酶Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Integrin alpha E2 整合素alpha E2  规格 0.1ml

HBcAb(Human anti-hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 人核心 96T

Pan Cytokeratin 英文名称: 广谱细胞角蛋白PCK 0.1ml

CATSPER3 英文名称: 阳离子通道相关蛋白3 0.2ml

Anti-phospho-Bcl 10(Ser218) 磷酸化Bcl-10Multi-class antibodies规格: 0.1ml

E4F1 英文名称: E4F转录因子1 0.2ml

瓜氨酸环肽 Anti-CCP 0.1ml

Anti-URGCP/URG4/FITC 荧光素标记病毒X蛋白(HBxAg)C端IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1.4(Ser27) 磷酸化组蛋白H1,4样蛋白 规格 0.1ml

CD146/MCAM 细胞粘附分子CD146抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

CXCR3 英文名称: 细胞表面趋化因子受体3 0.1ml

Anti-Calpain 1 钙蛋白酶1Multi-class antibodies规格: 0.1ml

HIV(Human anti-immunodeficiency virus antibody) ELISA Kit 人抗人类病毒Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-MAD1 Mad1Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ketohexokinase 肝果糖激酶 规格 0.2ml

sRANKL ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基 96T

PRDX5+PRDX6 英文名称: 过氧化还原酶5/6 0.1ml

 


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