PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
以下列是公司正在热销的产品：

浅绛红链霉菌拉丁属名: Streptomyces purpurascens

节杆菌属拉丁属名: Arthrobacter sp.

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

平菇注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

放射形根瘤菌用途: 固氮

炭疽芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus anthracis Cohn

玉米黑粉菌拉丁属名: Ustilago maydis

大肠埃希氏菌拉丁属名: Escherichia coli

浸麻类芽孢杆菌拉丁属名: Paenibacillus macerans

泡盛曲霉拉丁属名: Aspergillus awamori

毕赤酵母用途: 木聚糖酶应用于食品饲料工业

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis

李色链霉菌用途: 产生代谢产物具有抑菌活性

根瘤菌属拉丁属名: Rhizobium pusense
麝源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒供应商大鼠维生素D(VD)ELISA试剂盒英文名称：Rat Vitamin D,VD ELISA Kit进口/原装

大鼠维生素D2(VD2)ELISA试剂盒英文名称：Rat Vitamin D2,VD2 ELISA Kit进口/原装

GRK2/BARK1 (G-protein coupled receptor kinase 2) G蛋白偶合受体激酶2抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

PVR CD155 / PVR 鼠单抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-Crkl(Tyr244) 磷酸化接头蛋白CrkL 规格 0.1ml

BSA蛋白标准(2mg/ml) 1ml 自产

ZBBX 英文名称： 锌指蛋白ZBBX 0.2ml

CD9 英文名称： CD9蛋白 0.1ml

Anti-Death receptor 5/DR5/CD262 细胞调亡素/死亡受体5Multi-class antibodies规格： 0.1ml

BMP-2 小鼠骨形成蛋白-2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-FGF3/Oncogene INT2 纤维母细胞生长因子3Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/RBITC 罗丹明标记的小鼠抗兔IgM 规格 0.1ml

HRD(Human Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素 96T

SCLT1 英文名称： 钠离子通道相关蛋白1 0.1ml

CD53 英文名称： CD53 0.1ml

Anti-CYP3A4 细胞色素P450 3A4Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CD4 CD4(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-HP1 gamma 异染色质蛋白1-γMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHB16 原钙粘蛋白16 规格 0.2ml

APOH Kit Human 人 Apolipoprotein H / APOH ELISA配对 ELISA

TIP47 英文名称： 脂滴相关蛋白TIP47 0.2ml

CXCR1 英文名称： 细胞表面趋化因子受体1 0.1ml

Anti-Nogo-A 轴索过度生长抑制因子-AMulti-class antibodies规格： 0.1ml

P-PKC(Human phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 人磷酸化蛋白激酶CMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-NFAM1/CNAIP NFAM1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-2 白介素2 规格 0.2ml

L-Selectin/CD62L ELISA Kit 大鼠L选择素 96T

Phospho-Paxillin(Ser178) 英文名称： 磷酸化桩蛋白Paxillin 0.1ml