- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR4310
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-01-25
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR4310 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 规格 | 货号 |
山羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格 | 50T | LZR4310 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
大肠埃希菌拉丁属名: coli
刺孢小克银汉霉拉丁属名: Cunninghamella echinulata
地衣芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus licheniformis
山茶刺盘孢注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
枯草芽孢杆菌枯草亚种拉丁属名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
淡紫拟青霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
耐碱刺放线孢菌拉丁属名: Spinactinospora alkalitolerans
Bacillus tequilensis注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
粟酒裂殖酵母拉丁属名: Schizosaccharomyces pombe
黑曲霉拉丁属名: Aspergillus niger
乙酸钙不动杆菌拉丁属名: Acinetobacter calcoaceticus
大肠埃希氏菌拉丁属名: Escherichia coli
产氨短杆菌拉丁属名: Brevibacterium ammoniagenes
果生链核盘菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
根瘤菌拉丁属名: Rhizobium tubonense
山羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格ARID1B 英文名称: 基因结合蛋白ARID1B 0.2ml
Anti-WNT2B 信号通路Wnt2BMulti-class antibodies规格: 0.2ml
MPO-ANCA IgG ELISA Kit 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质IgGMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-UCP-2 线粒体脱偶连蛋白2Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCMA/GCM1 绒毛膜特异性转录因子GCMa 规格 0.2ml
SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit 小鼠基质细胞衍生因子1β 96T
NAT2 英文名称: N-乙酰基转移酶2 0.1ml
CD82 英文名称: 转移抑制蛋白1 0.1ml
Anti-Phospho-Merlin (Ser518) 磷酸化2型神经Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-NR2C/NMDAR2C 谷氨酸受体2CMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGF2BP2/IMP2 样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2 规格 0.2ml
IFN Alpha-Ab(Human Interferon AlphaAntibody) ELISA Kit 人抗α干扰素 96T
PGP9.5 英文名称: 神经细胞胞浆蛋白9.5(蛋白基因产物9.5) 0.1ml
IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白细胞介素-1β)(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-CD184/CXC-R4 细胞表面趋化因子受体4Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PANK1 泛酸激酶1 规格 0.2ml
HSPB1 Kit Human 人 HSP27 / HSPB1 ELISA配对 ELISA
Transferrin 英文名称: 转铁蛋白/血清铁传递蛋白 0.1ml
Cdc25C 英文名称: 细胞分裂周期蛋白25C 0.2ml
Anti-CD184/CXC-R4 细胞表面趋化因子受体4Multi-class antibodies规格: 0.1ml
CXCL16 英文名称: CXC趋化因子16 0.1ml
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Col III (Human Collagen Type III ) ELISA KIT 人Ⅲ型胶原Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-IFI16/p16 γ干扰素诱导蛋白16Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAP3K8/TPL2 原活化蛋白激酶激酶8 规格 0.2ml
ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脱氢酶 96T
phospho-Ret(Tyr1062) 英文名称: 磷酸化原癌基因酪酸蛋白激酶受体RET 0.1ml