客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

鲁氏接合酵母拉丁属名: Zygosaccharomyces  rouxii

日本曲霉拉丁属名: Aspergillus japonicus

猪丝菌拉丁属名: rhuriopathiae

大肠杆菌属拉丁属名: Escherichia  coli

聚生壳菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

球孢白僵菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  subtilis

四川散斑壳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

居真菌细菌拉丁属名: Mycetocola sp.

球孢白僵菌拉丁属名: Beauveria bassiana

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis

南极假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas antarctica

新疆盐地杆菌拉丁属名: Salinibacterium xinjiangense

凝结芽胞杆菌拉丁属名: Bacillus  coagulans

印度洋斯塔普氏菌拉丁属名: Stappia indica
芹菜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒供应商山羊抗小鼠 IgG(H+L)/AP 0.1ml 美国Jackson公司分装

VSV-G tag 英文名称： VSV-G tag标签 0.1ml

DLST 英文名称： DLST蛋白 0.2ml

Anti-Apollon/BIRC6 Apollon凋亡抑制蛋白Multi-class antibodies规格： 0.2ml

ERK4 英文名称： 原活化蛋白激酶4 0.1ml

神经生长因子受体 Anti-NGF-R/p75NTR/CD271 0.1ml

Anti-phospho-SHC (Tyr317)/FITC 荧光素标记磷酸化SH2结构域转化蛋白1IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CD80 英文名称： CD80 0.2ml

Anti-HSP22 热休克蛋白-22Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Human CA724 ELISA Kit 人标志物Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-HGF 肝细胞生长因子Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MHC class I 组织相容性复合体1多肽 规格 0.1ml

PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白酪酸磷酸酶 96T

RIT1 英文名称： RIT1蛋白 0.2ml

cellulase 英文名称： 纤维素酶 1ml

Anti-CD14 内毒素受体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒英文名称：Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit进口/原装

小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒英文名称：Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 进口/原装

小鼠网膜素(omentin)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse omentin ELISA Kit特价促销

小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Vitamin B6,VB6 ELISA Kit特价供应

小鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Vitamin C,VC ELISA Kit进口/原装

CX3CR1 英文名称： 趋化因子受体1 0.1ml

Anti-IL1RAPL1 白介素1受体相关蛋白样1前体蛋白Multi-class antibodies规格： 0.2ml

LKM(Human liver kidney microsome autoantibody) ELISA Kit 人抗肝肾微粒体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-IL-29/IFNL1 白细胞介素29Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LRRC2 LRRC2蛋白 规格 0.2ml

VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃酸 96T

phospho-RPS6KB1(Ser427) 英文名称： 磷酸化核糖体S6蛋白激酶 0.1ml