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- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR4304
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-03-10
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR4304 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 规格 | 货号 |
绵羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒供应商 | 50T | LZR4304 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
摩氏摩根菌拉丁属名: Morganella morganii subsp. morganii
葡萄座腔菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
华根霉拉丁属名: Rhizopus chinensis
乙假丝酵母拉丁属名: Candida ethanolica
水生拉恩氏菌拉丁属名: Rahnella aquatilis
根瘤菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
解蛋白弧菌拉丁属名: Vibrio proteolyticus
Lonsdalea quercina subsp. quercina注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
德曼链霉菌拉丁属名: Streptomyces demainii
康宁木霉拉丁属名: Trichoderma koningii
橄榄色青霉拉丁属名: Penicillium olivicolor
巴氏醋杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
刺盘孢属拉丁属名: Colletotrichum sp.
香菇注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
泡盛曲霉拉丁属名: Aspergillus awamori
绵羊源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒供应商phospho-Caspase 6 (Ser257) 英文名称: 磷酸化半胱胺酸蛋白酶蛋白6 0.1ml
Anti-C-jun 原癌基因蛋白/活化蛋白1Multi-class antibodies规格: 0.1ml
ATGA/TGAB(Human Anti-Thyroid Microsome Antibody) ELISA KIT 人抗甲状腺球蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-IL-6R Beta/CD130/gp130 白细胞介素6受体βMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LPL/PLASTIN2 脂蛋白脂酶 规格 0.1ml
Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人载脂蛋白H 96T
TIG2 英文名称: 视黄酸受体应答蛋白2 0.1ml
CD7 英文名称: CD7 0.1ml
Anti-Phospho-NFKB p65 (Ser468) 磷酸化细胞核因子NF-κB p65Multi-class antibodies规格: 0.1ml
WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-MTNR1B 褪黑素受体1BMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Insig2 诱导基因2 规格 0.1ml
Beta2-GP1 Ab IgM(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit 人β2糖蛋白1IgM 96T
Phospho-PAK1(Ser199 + Ser204) + PAK2 (Ser192 + Ser197) 英文名称: 磷酸化p21激活激酶1/2 0.1ml
ARL11 英文名称: ADP核糖基化因子样11 0.2ml
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化β 连环素蛋白IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-AP2 alpha/FITC 荧光素标记转录激活蛋白2αIgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM82A1 微管动力调节蛋白FAM82A 规格 0.2ml
MIS/AMH)ELISA Kit 大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素 96T
Mitochondrial ribosomal protein L11 英文名称: 线粒体核糖体蛋白L11 0.2ml
Cux2 英文名称: 转录同源蛋白质CUX2 0.1ml
Anti-Kiss-1 转移抑制基因Multi-class antibodies规格: 0.2ml
SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A(人唾液)Multi-class antibodies规格: 96T
Anti-RAR Beta 维甲酸受体βMulti-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh H9N1 Hemagglutinin A型病毒H9N1血凝素型 规格 1ml
Lp-PL-A2 ELISA Kit 大鼠脂蛋白磷脂酶A2 96T
PAGE4 英文名称: 相关蛋白4 0.2ml