上海联祖生物科技有限公司
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骆驼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒供应商
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4300
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-09-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4300
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

规格

货号

骆驼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒供应商

50T

LZR4300

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

苏云金芽胞杆菌用途: 用于抗虫基因的分离和抗虫相关基础研究。

胶胞用途: 教学科研

粉红镰孢拉丁属名: Fusarium roseum

布雷丝枝霉拉丁属名: Chaetocladium brefeldii

寄生曲霉拉丁属名: Aspergillus parasiticus

榆干侧耳、大榆磨拉丁属名: Pleurotus ulmarius (Bull. : Fr.) Quél

藤仓赤霉用途: 产赤霉素GA3

米根霉拉丁属名: Rhizopus oryzae

加德那氏链霉菌拉丁属名: Streptomyces gardneri

谷氨酸棒杆菌拉丁属名: Corynebacterium glutamicum

圈卷产色链霉菌拉丁属名: Streptomyces ansochromogenes

新城疫病毒拉丁属名: Newcastle       disease virus

红根须腹菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

胶孢注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

阪崎肠杆菌拉丁属名: Enterobacter  sakazakii
骆驼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒供应商CXCL5 英文名称: 上皮中性粒细胞活化肽78 0.1ml

Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) 磷酸化多巴胺/cAMP调节磷蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Survivin 细胞凋亡抑制因子的一种(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Anti-CD82/KAI1 转移抑制蛋白1Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh OVCA1 相关基因1 规格 0.2ml

CFH Kit Human 人 Complement Factor H / CFH ELISA配对 ELISA

TNFR1 英文名称: 坏死因子受体1 0.1ml

CD66a 英文名称: 癌胚抗原相关细胞粘附分子1 0.2ml

Anti-phospho-PAK1(Ser) 磷酸化p21激活激酶1Multi-class antibodies规格: 0.1ml

VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人纽蛋白Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Phospho-PAK1 (Ser199/204)/PAK2 (Ser192/197) 磷酸化p21激活激酶1/2Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HPR 结合珠蛋白相关蛋白 规格 0.2ml

Ach ELISA Kit 大鼠乙酰胆碱 96T

Phospho-PKR (Thr446 + Thr451) 英文名称: 磷酸化蛋白激酶R 0.1ml

TP53I13 英文名称: 蛋白p53诱导蛋白13(抑制基因) 0.2ml

CRMP4 英文名称: 脑衰蛋白反应调节蛋白4 0.2ml

Anti-CD79A/IGBP-1 免疫球蛋白结合蛋白-1Multi-class antibodies规格: 0.2ml

规格:2*96孔抗原2板ELISA试剂盒英文名称:Elisa进口/分装

猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒英文名称:Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit进口/分装

猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒英文名称:Porcine intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit进口/原装

猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒英文名称:Porcine plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit特价供应

Cullin 5 英文名称: 加压素激活钙启动受体蛋白1 0.2ml

Anti-LAIR-2/CD306 白细胞相关免疫球蛋白样受体2Multi-class antibodies规格: 0.2ml

LCN2(Human lipocalin 2) ELISA Kit 人脂质运载蛋白2Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr334) 磷酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh KCNA7 钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员7 规格 0.1ml

PGE1 ELISA Kit 大鼠素E1 96T

phospho-PRL (Ser163) 英文名称: 磷酸化泌乳素 0.1ml

 


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