上海联祖生物科技有限公司
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鹿源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4297
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-09-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4297
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

规格

货号

鹿源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

50T

LZR4297

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

玫瑰暗黄链霉菌拉丁属名: Streptomyces roseofulvus

木贼镰孢拉丁属名: Fusarium equiseti

土壤短波单胞菌拉丁属名: Brevundimonas terrae

球孢白僵菌用途: 生物防治

荧光假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas fluorescens

解脂假丝酵母解脂变种拉丁属名: Candida  lipolytica var. lipolytica

谷氨酸棒杆菌拉丁属名: Corynebacterium glutamicum

微白黄链霉菌拉丁属名: Streptomyces albidoflavus

奥斯陆莫拉氏菌拉丁属名: Moraxella osloensis

暗产色链霉菌拉丁属名: Streptomyces phaeochromogenes

南方正青霉拉丁属名: Penicillium meridianum

食酸戴尔福特菌拉丁属名: Delftia acidovorans

薛瓦酵母拉丁属名: Saccharomyces  chevalieri

甜菜假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas bei

苏云金芽胞杆菌鲇泽变种用途: 制备抗原标准菌株,毒杀鳞翅目昆虫
鹿源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg

S100A7 S100A7 兔单抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-CRK (Ser41) 磷酸化CRK 规格 0.1ml

品名 规格 备注

ZBTB38 英文名称: 锌指蛋白ZBTB38 0.2ml

Desmocollin 1 英文名称: 桥粒糖蛋白1 0.1ml

S100A7 S100A7 兔单抗 (FITC) Human

CD62L 英文名称: L选择素 0.1ml

Anti-GABA 兔抗γ1氨基丁酸Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Fc GammaR II /CD32(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR II ) ELISA Kit 人免疫球蛋白G Fc段受体ⅡMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-FOXO1 叉头蛋白O1Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse anti-rabbit IgG ascites 小鼠抗兔IgG腹水 规格 1ml

Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂素 96T

Semaphorin 5A 英文名称: 跨膜蛋白SEMA5A 0.2ml

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 英文名称: 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白 0.1ml

Anti-ANG-2/FITC 荧光素标记生成素-2IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白1Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-CD163/M130/FITC 荧光素标记CD163IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的驴抗人IgG 规格 0.1ml

HBsAg 表面抗原 96T

Msx2 英文名称: 同源盒基因Msx2 0.2ml

Cullin 2 英文名称: Cullin2 0.2ml

Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖细胞核抗原Multi-class antibodies规格: 0.1ml

GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶IIMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-MIF 巨噬细胞移动抑制因子Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IRAK4 白介素-1受体相关激酶4 规格 0.2ml

HBXIP(Human hepatitis B virus X interacting protein) ELISA Kit 人病毒X蛋白相互作用蛋白 96T

PCDHGA5 英文名称: 原钙粘蛋白γA5 0.2ml

 


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