客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

中慢生华癸根瘤菌用途: 与沙打旺共生固氮

柠条根瘤菌用途: 与柠条共生固氮

瑞士乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus  helveticus

异常汉逊酵母拉丁属名: Hansenula anomala

小克银汉霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  subtilis

四孢脉孢菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis

豇豆慢生根瘤菌用途: 与金合欢、黑荆相思树共生固氮

黑木耳拉丁属名: Auricularia  auricula

赖氨酸芽孢杆菌拉丁属名: Lysinibacillus sp.

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

戊糖片球菌*拉丁属名: Pediococcus pentosaceus

罗伊氏乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus  reuteri

热噬淀粉芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  thermoamylovorans
芥末源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 Anti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高迁移率族蛋白A1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-AAK1 AP2关联激酶1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun 规格 0.1ml

羊抗人IgG血清 0.5ml 国产

WNK4 英文名称： WNK4 0.1ml

DRD3 英文名称： 多巴胺受体D3 0.1ml

Anti-AAK1 AP2关联激酶1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CD59 英文名称： CD59 0.2ml

Anti-IAA 吲哚乙酸/植物生长素单克隆Multi-class antibodies规格： 0.2ml

AFP-L1(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1) ELISA Kit 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-HDAC7 (Ser318) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶7Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MK5/MAP2K5 原活化蛋白激酶激酶5 规格 0.1ml

AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit 人天门冬酸基转移酶 96T

RNF45 英文名称： 环指蛋白45/自分泌运动因子受体 0.2ml

人凝胶原蛋白(gelson)ELISA试剂盒英文名称：Human gelson ELISA Kit进口/分装

PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Kir6.2 ATP敏感性钾通道亚基kir6.2Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-AKT3 (Ser472) 磷酸化蛋白激酶AKT3 规格 0.1ml

Myosin skeltal,muscle 浓缩液 0.1ml 进口分装

Ulex Europaeus Lectin 1 英文名称： 荆豆凝集素1 0.1ml

DACH2 英文名称： 转录调节因子DACH2 0.2ml

CTRP5 英文名称： 补体C1q和坏死因子相关蛋白5 0.2ml

Anti-P63 protein P63 抑制基因Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-MMP-12 基质金属蛋白酶-12Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Integrin Alpha X/CD11c 整合素αX 规格 0.1ml

IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11 96T

Proteasome 20S C2 英文名称： 蛋白酶体PSMα1 0.2ml