上海联祖生物科技有限公司
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胡萝卜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4286
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-09-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4286
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

规格

货号

胡萝卜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格

50T

LZR4286

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

球孢白僵菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

极细枝孢拉丁属名: Cladosporium tenuissimum

大肠杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

胶冻样芽胞杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

大肠埃希菌拉丁属名: coli

厚环粘盖牛肝菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

燕麦镰孢拉丁属名: Fusarium avenaceum

裂孔平伏菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

大豆慢生根瘤菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

蜡状芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  cereus

小孢根霉寡孢变种拉丁属名: Rhizopus microsporus var. oligosporus

猴头菇注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

薄层菌属拉丁属名: Hymenobacter sp.

郎伍德链霉菌拉丁属名: Streptomyces longwoodensis
胡萝卜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格Cardiac FABP 英文名称: 脂肪酸结合蛋白3 0.1ml

Anti-Integrin beta 2/CD18/LFA-1 整合素β2Multi-class antibodies规格: 0.1ml

XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Anti-Alpha-Catenin α-连环蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCDHGC3/PCDH2 原钙粘蛋白γC3 规格 0.2ml

FLT4 Kit Human 人 VEGFR3 / FLT4 ELISA配对 ELISA

TNFSF13 英文名称: 坏死因子配体超家族成员13 0.2ml

CD46 英文名称: 膜辅蛋白 0.2ml

Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100 细胞核因子/k基因结合核因子 p52/p100Multi-class antibodies规格: 0.2ml

ADH/VP/AVP(Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 人抗激素/加压素/精氨酸加压素Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Leptin 瘦素Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh KMT1C/G9a 组蛋白H3赖氨酸9甲基化1C 规格 0.2ml

RLN(Human Relaxin) ELISA Kit 人松弛肽/松弛素 96T

Phospho-PLC gamma 1(Ser1248) 英文名称: 磷酸化磷酯酶Cγ1 0.1ml

phospho-APC1 (Ser355) 英文名称: 磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1 0.1ml

Anti-Annexin I/FITC 荧光素标记人、大、小鼠膜粘连蛋白 IIgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

ALD ELISA Kit 大鼠醛固酮Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 荧光素标记神经母细胞特异性转移因子IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM123B/AMER1 肾母细胞瘤X蛋白 规格 0.2ml

MBP ELISA Kit 大鼠主要碱性蛋白 96T

MOG 英文名称: 髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白 0.1ml

Ctip2 英文名称: B淋巴细胞/11B 0.2ml

Anti-L-Citrulline L-瓜氨酸Multi-class antibodies规格: 0.2mg

C3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit 人补体片段3cMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-RRM1 核糖核苷酸还原酶1Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh HDAC6 组蛋白去乙酰化酶6 规格 0.1ml

Beta Manase(Mouse Beta mannosidase) ELISA Kit 小鼠β甘露糖苷酶 96T

PAX9 英文名称: 配对盒基因9 0.1ml

 


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