客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

球孢白僵菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

嗜铁钩端螺菌拉丁属名: Leptospirillum ferriphilum

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis

淡紫拟青霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

植物乳杆菌拉丁属名: Lactobacillus plantarum

假单胞菌用途: 成膜菌

芽孢杆菌属拉丁属名: Bacillus  sp.

栗疫菌拉丁属名: Cryphonectria parasitica

草木樨中华根瘤菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

大肠埃希氏杆菌拉丁属名: Escherichia  coli

云芝*拉丁属名: Coriolus Versicolor (L.:Fr.) Quel

苏云金芽胞杆菌用途: 科研研究

嗜水气单孢菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

巴氏醋杆菌拉丁属名: Acetobacter pasteurianus
核桃源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格Rhesus antibody Rh Orexin-A 增食欲素A/欲激素A 规格 0.1ml

CD300C Kit Human 人 CD300C ELISA配对 ELISA

TRAF4 英文名称： 坏死因子受体相关蛋白4 0.1ml

C1orf98 英文名称： 1号染色体开放阅读框98 0.2ml

Anti-CD337/NKp30/NCR3 细胞毒性受体NK-p30Multi-class antibodies规格： 0.2ml

鱼促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒英文名称：ACTH ELISA Kit特价供应

鱼骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒英文名称：Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit特价供应

CD45 英文名称： 白细胞共同抗原 0.1ml

Anti-Inhibin beta B 抑制素βBMulti-class antibodies规格： 0.2ml

pANCA(Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒细胞核周Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Inhibin Beta C 抑制素βCMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LMP7 低分子量蛋白7 规格 0.2ml

SEP1(Human selenoprotein 1) ELISA Kit 人硒蛋白1 96T

phospho-Rb (Ser249) 英文名称： 磷酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1 0.1ml

猪组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒英文名称：Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit进口/分装

猪组织因子(TF)ELISA试剂盒英文名称：Porcine Tissue factor,TF ELISA Kit进口/原装

SREBP-1(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1) 固醇调节元件结合蛋白1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Phospho-A Raf (Tyr301/302) 磷酸化A-RafMulti-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Perilipin A 脂滴包被蛋白Perilipin-A 规格 0.1ml

CEA 癌胚抗原 1:150 浓缩液 0.1ml 进口分装

TORC1 英文名称： 环腺苷酸应答元件结合蛋白转录共激活因子TORC1 0.2ml

CTH 英文名称： 胱硫醚γ裂解酶 0.2ml

Anti-NPY 神经肽YMulti-class antibodies规格： 0.1ml

RTKs(Human receptor tyrosine kinase) ELISA Kit 人受体酪氨酸激酶Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-NPM (Thr199) 磷酸化核仁磷酸蛋白Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IGSF2/CD101 CD101 规格 0.2ml

INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit 小鼠抑制素B 96T

phospho-PRKCB(Ser642) 英文名称： 磷酸化蛋白激酶C 0.1ml