上海联祖生物科技有限公司
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狗源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4278
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-12-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4278
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

规格

货号

狗源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格

50T

LZR4278

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

虫草拉丁属名: Cordyceps sp.

恶臭假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas putida

粘质沙雷氏菌拉丁属名: Serratia  marcescens

顶头孢霉拉丁属名: Cephalosporium  acremonium

白绒红蛋巢菌拉丁属名: Nidula niveotomentosa

焦曲霉拉丁属名: Aspergillus ustus (Bainier) Thom et Church

总状共头霉拉丁属名: Syncephalastrum racemosum

耐辐射奇球菌拉丁属名: Deinococcus  radiodurans

散囊菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

烟曲霉拉丁属名: Aspergillus fumigatus

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

光滑青霉拉丁属名: Penicillium glabrum

茯苓注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

嗜麦芽寡养单胞菌拉丁属名: Pseudomonas maltophilia (ex Hugh and Ryschenkow 1961) Hugh 1981

鲁氏毛霉拉丁属名: Mucor rouxianus (Calmette) Wehmer
狗源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格C8orf86 英文名称: 8号染色体开放阅读框86 0.2ml

Anti-phospho-c-Jun (Ser243) 磷酸化原癌基因c-JunMulti-class antibodies规格: 0.1ml

Melamine/OVA(ovalbumin) 三聚氰胺与鸡卵白蛋白偶联物Multi-class antibodies规格: 10mg

Anti-CDK7 周期素依赖性激酶7Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh OGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase 8-羟基鸟嘌呤DNA糖基化酶 规格 0.1ml

Protein G Sepharose 4 Fast Flow 重组蛋白G亲和层析柱 2ml柱床体积

TIMP-1(CT) 英文名称: 金属蛋白酶组织抑制因子-1(C端) 0.1ml

CD44v4 英文名称: CD44V4 0.1ml

Anti-E-cadherin 上皮钙粘附分子Multi-class antibodies规格: 0.1ml

DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit 人二氢嘧啶酶样3Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-MTHFR 亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFRMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Insulin 蛋白 规格 0.1ml

TIMP-3 ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3 96T

Phospho-PAK2 (Ser20) 英文名称: 磷酸化p21激活激酶2 0.1ml

ARFIP1 英文名称: ADP核糖基化因子结合蛋白1 0.1ml

Anti-CD3/RBITC 红色荧光素罗丹明标记CD3IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

NAP-2/CXCL7 ELISA Kit 大鼠中性粒细胞趋化蛋白2Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-ApoB/FITC 荧光素标记载脂蛋白BIgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM59A FAM59A蛋白 规格 0.2ml

FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 小鼠凋亡相关因子 96T

MYL1+3 英文名称: 肌球蛋白轻链1/3 0.2ml

CTCF 英文名称: 转录阻抑蛋白CTCF 0.2ml

Anti-Phospho-FADD (Ser191) 磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml

HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人状瘤病毒IgMMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-MAGE-1 相关抗原Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh KDEL (ER Marker) 赖氨酸,天冬氨酸,谷氨酸,亮氨酸相关序列 规格 0.2ml

Big ET ELISA Kit 大鼠大内皮素 96T

PDZD6 英文名称: PDZ结构域PDZK6蛋白 0.2ml

 


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