客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

拟青霉拉丁属名: Paecilomyces sp.

香菇用途: 食用

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

烬灰链霉菌拉丁属名: Streptomyces cinereogriseus (krainsky ss Krassilnikov) Yan et al.

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

浅玫瑰链霉菌拉丁属名: Streptomyces roseolus

干草鞘氨单胞菌拉丁属名: Sphingomonas faeni

金黑小单孢菌拉丁属名: Micromonospora auratinigra

注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

米曲霉拉丁属名: Aspergillus  oryzae

*红城红球菌用途: 石油降解菌

产二素链霉菌拉丁属名: Streptomyces ambofaciens

链格孢 苹果专化型注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

玉米大斑病菌拉丁属名: Setosphaeria tuicicum

尖孢镰孢拉丁属名: Fusarium oxysporum
豹源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基质金属蛋白酶13抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Angiopoietin 2 生成素2Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin(Ser45) 磷酸化β 连环素蛋白 规格 0.1ml

单组分TMB底物液 12ml/100ml 进口分装

VSIG4 英文名称： T淋巴细胞负调节蛋白 0.1ml

DLGAP2 英文名称： PSD95结合蛋白2 0.2ml

Anti-Angiopoietin 2 生成素2Multi-class antibodies规格： 0.1ml

CD4 英文名称： CD4 0.1ml

Anti-Insulin (pig) (猪)Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Bcl-2(Human B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA Kit 人B细胞因子2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Gst P1/GST class-pi 谷胱甘肽硫转移酶pi基因Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MeCP2 甲基化CpG结合蛋白2 规格 0.1ml

pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 人磷酸化细胞外信号调节激酶 96T

RIPK-1 英文名称： 丝酸苏酸激酶1受体相互作用蛋白 0.1ml

尿酸盐重吸收转运子1 Anti-OAT4L/URAT1 0.1ml

Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 荧光素标记磷酸化细胞信号转导分子SMAD2IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NPM (Thr95) 磷酸化核仁磷酸蛋白 规格 0.1ml

AEG-1 peptide AEG-1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

人克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA试剂盒 英文名称：Human Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 特价促销

人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒英文名称：Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit进口/分装

人空泡毒素相关蛋白A(VacA)ELISA试剂盒英文名称：Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit特价促销

CT74 英文名称： /抗原74 0.2ml

Anti-phospho-p38(Thr180/Tyr182) 磷酸化-原活化蛋白激酶p38Multi-class antibodies规格： 0.1ml

HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人IgGMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Ku-80 DNA修复酶Ku-80Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Laminin 1+2 层粘连蛋白1+2 规格 0.1ml

GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮质激素受体α 96T

PTBP1 英文名称： 核糖核酸结合蛋白1 0.2ml