PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

金黄弗拉特氏菌拉丁属名: Frateuria aurantia

围小丛壳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

雕刻拟盘多毛孢拉丁属名: Pestalotiopsis carveri

奇异球菌属拉丁属名: Deinococcus  sp.

海水甲基杆菌拉丁属名: Methylobacterium salsuginis

高卢蜜环菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

千叶链霉菌拉丁属名: Streptomyces chibaensis

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

郝氏链霉菌拉丁属名: Streptomyces halstedii

香菇8注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

松杉灵芝拉丁属名: Ganoderma tsugae Murrill

苜蓿中华根瘤菌用途: 与苜蓿结瘤固氮效果很好

刺芹侧耳注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

假坚强芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus pseudofirmus

链霉菌用途: 产抗菌素
鹌鹑源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Anti-Phospho-TAK1 (Thr187)/FITC 荧光素标记磷酸化转化生长因子β活化激酶1IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MK1/MAP2K1(Thr386) 磷酸化原活化蛋白激酶1 规格 0.1ml

Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝聚素α/β抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

人大肠菌素(colicin)ELISA试剂盒英文名称：human colicin ELISA Kit进口/原装

人大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒英文名称：Human Big Endothelin,Big ET ELISA Kit特价供应

人大疱性类天疱疮(BP)ELISA试剂盒英文名称：Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit进口/原装

人单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒英文名称：Human monoamine oxidase,MAO ELISA Kit特价供应

CD3E 英文名称： CD3/CD3-ε  0.1ml

Anti-IGF II/IGF2 样生长因子-IIMulti-class antibodies规格： 0.1ml

THAA(Human thyroid hormone autoantibodies) ELISA Kit 人甲状腺非肽激素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-IGF1R/CD221 样生长因子1受体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mammaglobin A 珠蛋白1 规格 0.2ml

BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 人骨成型蛋白受体Ⅱ 96T

RERE 英文名称： 肌相关蛋白1 0.2ml

颗粒蛋白前体 Anti-PGRN 0.1ml

Anti-STAT2/FITC 荧光素标记信号转导和转录激活因子2(STAT2)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MyoD1(Ser200) 磷酸化肌原调节蛋白 规格 0.1ml

GFRAlpha-1(GDNF family receptor alpha-1) GDNF家族受体α-1(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

人乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒英文名称：Human aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit特价促销

人乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒英文名称：Human acetylcholine，ACH ELISA Kit特价供应

人乙酰胆碱受体(AChRab)ELISA试剂盒英文名称：Human acetylcholine receptor antibody，AChRab ELISA Kit 进口/分装

CT26 英文名称： /抗原26 0.2ml

Anti-PCNA-Proliferation Marker 增殖细胞核抗原Multi-class antibodies规格： 0.1ml

PSA-U S(Human Ultra Sensitive Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人超敏特异性抗原Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Leptin receptor(L/M/S) 瘦素受体(长、中、短型)Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh KLLN Killin-p53调节复制抑制蛋白 规格 0.2ml

Human Pancreastatin ELISA Kit 人胰抑制素 96T

Plasminogen 英文名称： 纤维蛋白溶酶原 0.1ml