上海联祖生物科技有限公司
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螺源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4262
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-12-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4262
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

螺源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格


LZR4262

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

蹄形干酪菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

产水链霉菌拉丁属名: Xanthobacter tagetidis

棉子糖肠球菌拉丁属名: Enterococcus raffinosus

雅致小克银汉霉拉丁属名: Cunninghamella  elegans

雅致放射毛霉拉丁属名: Actinomucor elegans

科罗拉多拟无枝酸菌拉丁属名: Amycolatopsis coloradensis

杰丁塞伯林德纳氏酵母拉丁属名: Cyberlindnera jadini

美澳型核果褐腐病菌拉丁属名: Monilinia fructicola

娄地青霉拉丁属名: Penicillium roqueforti

少孢节丛孢拉丁属名: Arthrobotrys oligospora

大肠埃希菌拉丁属名: coli

果生链核盘菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

微球菌拉丁属名: Micrococcus  sp.

美极梅奇酵母拉丁属名: Metschnikowia pulcherrima

刚第弓形虫拉丁属名: gondii
螺源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒规格Salusin-α ELISA试剂盒英文名称:Human Salusin α ELISA Kit进口/原装

SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒英文名称:Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit进口/原装

IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 样生长因子2 mRNA 结合蛋白3抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Anti-ACEI 紧张素1转换酶抑制剂Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-CDKN2A/P16 (Ser152) 磷酸化基因p16 规格 0.1ml

人血清IgA液体(70-80%) 10mg 国产

WAVE 1 英文名称: 富含脯酸同源蛋白1 0.2ml

CD36 英文名称: CD36 0.1ml

Anti-HRH3/GPCR97 组织胺H3受体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

PA-IgG/M/A(Human platelet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit 人抗血小板IgG/M/AMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-IL-8/CXCL8 (mouse, rat) 白介素8 (小鼠,大鼠)Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Lpin1 protein Lpin1  规格 0.2ml

Hyl(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人羟赖酸 96T

RNF126 英文名称: 环指蛋白126 0.2ml

phospho-DAXX (Ser668) 英文名称: 磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白 0.1ml

ADAM15 ADAM15 鼠单抗 (PE) Human

ELF1 英文名称: 转录因子ELF1 0.2ml

生精细胞凋亡相关基因3 Anti-TSARG3 0.2ml

Anti-TREML1/TLT1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系细胞触发受体样转录因子1IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser1101) 磷酸化受体底物-1 规格 0.1ml

Secretin receptor 分泌素受体(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg

CST8 英文名称: 胱抑素8/半胱酸蛋白酶抑制剂8 0.2ml

Anti-FAK2/Pyk2 富含脯氨酸的酪氨酸激酶2Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Cytochrome-C 大鼠细胞色素CMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-beta endorphin β-内啡肽Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Musashi 1/Msi1 神经干细胞RNA结合蛋白Musashi1 规格 0.2ml

PAIg(Human platelet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相关免疫球蛋白 96T

SEC14 like protein 2 英文名称: SEC14样蛋白2 0.2ml

 


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